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活体分析采用微扰、无损、在线的活体样本采集方式突破了分析对象在样本采集过程中生命终结的瓶颈,因此被广泛用十临床诊断领域。由于参与生命活动的物质既有蛋白质、脂肪、碳水化合物等大分子,还有维生素、寡糖、氨基酸等小分子。研究这些化合物在活体中的含量及变化对认识生命过程具有重要的意义。
基质辅助激光解吸/电离(MALDI)和电喷雾电离(ESI)技术作为一种“软”电离技术自其诞生以来就被广泛的用于研究生物大分子。由于MALDI电离过程中采用的基质是在激光器波长处有强紫外吸收的有机小分子化合物,这些化合物吸收激光能量后,容易在低分子量区形成碎片离子或簇离子进而干扰对小分析化合物的检测。鉴于此,我们引入新的萘乙二胺盐作为MALDI基质,采用负离子模式成功的分析了多种小分子化合物。主要内容如下:
(1)盐酸荼乙二胺(NEDC)具有强的紫外吸收特性、负离子模式的激光解吸/电离(LDI)谱图在低分子量区基本无背景干扰,作为基质具有优异的耐盐性,因此结合MALDI质谱仪分析了水果中的寡糖和果酸及对大鼠脑透析液中的葡萄糖进行了活体检测。
(2)以硝酸萘乙二胺(NEDN)为基质,采用负离子扫描模式的MALDI质谱仪分析了寡糖、多肽、代谢物、爆炸物等小分子化合物。结果表明:以NEDN为基质分析样品具有较高的检测灵敏度。
(3)由于电喷雾电离源(ESI)分析寡糖的灵敏度较低,为此,我们把ESI改造成超声电喷雾电离源(ESSI)。采用ESSI分析了水果中的寡糖和果酸。结果表明:采用正离子模式的ESSI分析寡糖较负离子模式更直观。