电子束辐照对灰葡萄孢菌的抑制作用及草莓抗病能力的研究

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以草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)为供试菌,采用电子束辐照的技术分别对灰葡萄菌分生孢子、菌丝及新鲜的草莓进行辐照处理。采用琼脂表面萌发法及显微摄像观察测定辐照对分生孢子萌发活性及形态;通过诱导培养基摇床培养测定不同辐照剂量对灰葡萄孢菌相关细胞壁降解酶活性的影响,初步探讨了辐照对供试菌的抑菌活性及相关机理;并采用活体组织法研究了辐照对草莓的致病力及其直接辐照草莓后果实体内相关抗性酶的活性。研究结果如下:1、以灰葡萄孢病菌(Botrytis cinerea)分生孢子为研究对象,采用0.5、1.0、2.0和3.0 kGy剂量电子束辐照灰葡萄孢分生孢子,分别测定0℃、5℃、10℃、15℃、20℃、25℃培养条件下辐照对灰葡萄孢分生孢子的萌发活性及致病力的影响。结果表明:电子束处理可显著抑制灰葡萄孢菌分生孢子的萌发率、芽管伸长及菌丝分枝的形成,延迟其达到完全萌发的时间,降低其致病力,且剂量越高,效果越明显。1.0 kGy以上处理可显著抑制灰葡萄孢菌分生孢子的萌发活性,延缓分生孢子达到完全萌发的时间;并且温度越低这种效果越明显。与对照组相比,不同培养温度下,1.0 kGy以上电子束处理均可显著抑制分生孢子的萌发,在5℃条件下培养,分生孢子的萌发活性显著降低,完全萌发时间显著延长,1.0、2.0和3.0 kGy处理的分生孢子在5℃条件下达到完全萌发的时间分别为14、16和18 d;分别较对照延长了2、4和6 d。芽管伸长及菌丝分枝得到有效抑制, 5℃条件下24 h时,1.0 kGy处理芽管长度仅为41.42 µm,为对照芽管长度的65.75 %,48 h时,5℃、1.0 kGy处理菌丝未产生分枝。此外,电子束辐照可以降低分生孢子的致病力,25℃,2d时,2.0 kGy处理病情指数为4.17;10℃、9 d时,2.0 kGy处理的病情指数为2.60; 5℃、15 d时,2.0 kGy病情指数仅为15.28,而对照则分别高达25.00、18.36和62.50。2、以灰葡萄孢菌丝为研究对象,经电子束辐照后采用诱导培养基摇床培养,测定细胞壁降解酶活性及菌丝的致病力。结果表明:当酶活达到峰值时,聚甲基半乳糖醛酸酶、果胶酶、羧甲基纤维素酶和β-葡萄糖苷酶对照组的酶活性依次是,424.55 u/g、436.00 u/g、35.67 u/g和306.72 u/g,而2.0 kGy辐照处理各酶活性在峰值时依次为301.01 u/g、361.41 u/g、19.05 u/g和178.35 u/g。同时,辐照可以降低菌丝的致病力,25℃,2d时,2.0 kGy处理病情指数为2.78;10℃、8 d时,2.0 kGy处理的病情指数为44.44; 5℃、15 d时,2.0 kGy病情指数仅为13.89,而对照则分别高达19.44、98.61和61.11。3、电子束辐照处理可以明显延缓草莓果实的发病情况,抑制病斑直径,并能提高与抗病相关的酶活性及各抗病物质的含量。1.0 kGy电子束处理即可以降低草莓的发病情况,延缓发病率及病斑直径,并且在一定程度上提高与果实自身抗病相关的酶SOD、POD、PAL的活性(P<0.05),再酶活性达峰值时,25℃及5℃、1.0 kGy处理POD酶活性分别为506.67 u/g及556.67u/g,而此时25℃及5℃对照的酶活则分别为506 u/g和493.94 u/g;SOD酶活分别为69.92 u/g和254.04 u/g,分别为对照组SOD活性的1.26倍和1.54倍;对照组PAL活性分别是98.27 u/g和108.13 u/g,分别是峰值时1.0 kGyPAL活性的72.15 %和84.74 %。同时,辐照处理可以不同程度的提高类黄酮、总酚及木质素的含量,提高果实自身抗病的能力。
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