[研究背景]肾细胞癌(renal cell carcinoma,RCC)是起源于肾实质泌尿小管上皮系统的恶性肿瘤,占肾脏恶性肿瘤的80%-90%。,约占成人恶性肿瘤的2%-3%。各个国家或者地区的发病率不同,发达国家发病率高于发展中国家,每年死于肾细胞癌的人数大约有10万多例并且发病率还在逐年递增[1-3]。我国各地区肾癌的发病率差异也较大,据全国肿瘤防治研究办公室和卫生统计信息中心统计我国试点市,县1988-1997年肿瘤发病及死亡资料显示:肾癌的发病率和死亡率均有上升趋势;男女比例约为2:1;城市地区高于农村地区,发病年龄可见于各年龄段,高发年龄为50-70岁。外科手术仍然是局部性肾癌的首选治疗方法,然而对于转移性肾癌尚无标准的治疗方案仍采用内科为主的综合治疗,极少数患者可通过外科手术而治愈。所以,研究肾细胞癌的发病机理和治疗方法已经成为泌尿外科临床治疗中努力的方向。1988年,国内建成了首例体外培养的“人肾癌细胞系”[4]。为人肾细胞癌的基础和临床研究提供了极其重要的细胞实验模型。但是随着实验的不断开展,需要对细胞系进行不断的体外传代,于是一些生物学特征会渐渐的改变或消失,所以不断建立新的细胞系已经成为研究肾细胞癌的发病机理和探寻新的治疗方法的重要环节。裸鼠,顾名思义为无毛鼠,于1962年由英国的Crist发现。裸鼠体内无胸腺,因此无法生成成熟的T淋巴细胞,所以具有免疫缺陷的特性。移植于裸鼠的人体肿瘤组织,因受到较小的排斥反应而更容易生长存活。1969年,Rygaard首次建立了裸鼠人结肠腺癌模型。目前为止世界上已经建立了500种以上的人体肿瘤裸鼠模型。裸鼠现在已经成为研究人体恶性肿瘤的生物学特性以及筛选针对相应肿瘤的抗癌药物的常用工具,其应用范围包括肿瘤学,免疫学,细胞生物学以及药理学等各项基础医学[5]直接对裸鼠皮下进行手术标本组织块的包埋移植法其移植的成功率要高于利用手术标本组织块直接培养法以及利用手术标本组织块制成肿瘤细胞悬液直接注射法,成为建立肿瘤细胞系的常用方法。因此本研究根据此方法成功建立了一株稳定传代的肾细胞癌细胞系。[目的]利用肾癌病人手术标本皮下包埋于裸鼠的方法建立裸鼠移植模型,通过裸鼠间传代及体外传代培养的方法建立了一株新的人肾癌细胞系,并且初步对该细胞系进行鉴定,为进一步的肾癌基础研究提供了实验模型。[方法]1.人肾癌原代细胞系的建立2008-2009年间共采集20例肾癌新鲜手术标本,于手术后1 h内将每例标本切取四块0.5 cm×0.5 cm×0.5 cm组织块,分别包埋于2只裸鼠的右后肢皮下及背部皮下,连续鼠间传代3次,取移植瘤继续体外培养传代,连续传110代2.人肾癌原代细胞系的生物学特性鉴定对得到的细胞株进行细胞形态的观察,绘制细胞株生长曲线,细胞DNA含量测定,染色体核型分析,软琼脂集落形成率实验,刀豆球蛋白A凝集实验,白细胞介素6的生物活性测定及病理学检查。[结果]1.人肾癌原代细胞系的建立其中1只裸鼠皮下移植瘤生长,继续传代,肿瘤生长速度明显加快。取移植瘤标本行体外组织块培养,连续传110代后,得到人肾癌细胞株记为XJG-9201。2.人肾癌原代细胞系的生物学特性鉴定细胞形态结构,分化程度均与原发肿瘤一致;染色体众数为65;细胞群体倍增时间为38.2 h;细胞周期分析:G1期62.7% ,G2期11.2% ,S1期25.3% ,;软琼脂集落形成率为70%;当刀豆球蛋白A浓度为12.5μg/ml时,细胞即发生明显凝集;病理学检查具有肾透明细胞癌的特征。[结论]1.成功建立了一例肾癌原代细胞系XJG-9201。2.肾癌细胞系XJG-9201与原发癌保持相同的生物学特性,体外连续传代1年以上传115代。细胞形态不变,生长周期恒定,已成为一个稳定的细胞系。