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香水莲花(Nymphaea hybird)(带雄蕊的花托)是睡莲科睡莲属热带大型睡莲,其化学成分和生物活性已有初步研究报道,主要含有多糖、黄酮、鞣质等活性成分。结合前人的研究,本文再次对香水莲花醇溶性成分进行了提取、分离、纯化及结构鉴定:由于含有较多酚羟基类的大极性物质,为便于成分研究,将醇提浓缩物的沉淀部位进行了乙酰化,并对酰化产物进行了分离、纯化及结构初步鉴定;初步研究了香水莲花提取物及各部位的抗氧化活性和抑制酪氨酸酶的活性。此外,还对香水莲花总黄酮的微波提取工艺进行了研究,并对其黄酮成分进行了纯化。
首先,采用75%的乙醇对香水莲花干花进行回流提取,浓缩得到的粗提物的乙酸乙酯部位分别经硅胶柱层析、凝胶SephadexLH-20柱层析分离纯化,采用薄层层析及高效液相色谱法鉴别纯度,得到了1个较纯的化合物。经核磁共振(包括1H-NMR、13C-NMR)、红外光谱等手段首次在该植物中鉴定出了3,4,5-三羟基苯甲酸,即没食子酸,其余成分的鉴定工作仍在进行中;研究发现香水莲花干花中含有的多酚类物质较多,为化学成分的分离纯化增加了难度,经多次纯化得到的组分纯度仍未达到鉴定的要求,为此将醇提物沉淀部位的酰化产物进行了分离、纯化及结构初步鉴定,主要结构为乙酰化的多羟基黄酮葡萄糖甙。
其次,对香水莲花总黄酮的微波提取工艺进行了研究,确定了最佳的微波提取条件:乙醇浓度为70%,微波功率250 W,提取时间40 min,液料比25:1。采用D101大孔树脂对香水莲花微波最佳条件所得的醇提物用不同浓度的乙醇进行分离,得到的30%乙醇洗脱部位以正己烷-正丁醇-甲醇-水(1:4:2:6)为两相溶剂系统,在主机转速800 r/min、流速1.8 mL/min、检测波长254nm的条件下,应用高速逆流色谱法进一步分离了香水莲花的黄酮类成分。
最后,对香水莲花醇提物的抗氧化活性和香水莲花各提取物抑制酪氨酸酶的活性进行了研究。抗氧化实验结果表明:香水莲花醇提物对超氧阴离子自由基及羟自由基具有清除作用;具有一定的还原能力和总抗氧化能力。抑制酪氨酸酶活性实验以L-酪氨酸为底物,以熊果苷为阳性对照,从马铃薯中提取酪氨酸酶,分别以香水莲花醇提物、水提物及总黄酮为实验样品,结果表明:香水莲花总黄酮对酪氨酸酶的抑制活性优于香水莲花醇提物,且两者对酪氨酸酶的抑制率均相当于阳性对照熊果苷对酪氨酸酶的抑制率,可以考虑将其作为一种新型植物源的美白剂,应用于化妆品行业。