丹参酮Ⅱa对大鼠同种异体植皮的免疫调节作用及机制研究

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目的:观察丹参酮Ⅱa在大鼠同种异体皮肤移植模型中是否可以有效发挥免疫调节作用,并确定其的免疫调节机制,为其临床应用提供实验支持。方法:1、设定Wistar大鼠为供体,Lewis大鼠为受体,在Lewis大鼠背面做2cm×2cm的全层皮肤缺损,将Wistar大鼠全层背部皮肤移植到Lewis大鼠背部,加压包扎。2、根据用药的不同将大鼠随机分成4组:阴性对照组(control)、丹参酮Ⅱa组(TANⅡa)、阳性对照组(环孢素A, CsA)、丹参酮Ⅱa+环孢素A组(TANⅡa+CsA)。3、于术后行如下检测:①每日拍照,统计移植皮肤完全排斥的时间。②取各组移植皮肤组织,固定包埋后行HE染色,观察组织学形态。)Realtime-PCR检测移植皮肤中干扰素-γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)的表达量。④ELISA试剂盒检测各组移植皮肤中生长因子-β1(TGF-β1)的表达量。⑤流式细胞仪检测外周血单核细胞中表达CD3、CD4、CD8阳性的T细胞含量。结果:1、TANⅡa组移植皮肤存活时间明显大于Control组(P<0.05); CsA组大于TANⅡa组:TANⅡa+CsA皮肤存活时间大于CsA组(P<0.05)。2、RT-PCR检测显示:PANⅡa组移植皮肤中IFN-γ、TNF-α、IL-2的mRNA含量表达明显低于Control组(P<0.05),TANⅡa+CsA组低于CsA组(P<0.05);CsA组IL-2的mRNA含量表达低于TANⅡa组(P<0.05),两组IFN-γ、TNF-α的mRNA含量表达之间无统计学差异(P>0.05)。3、TANHa组移植皮肤中TGF-β1的表达明显高于Control组(P<0.05),TANⅡa+CsA组高于CsA组(P<0.05),TANⅡa组与CsA组之间无统计学差异(P>0.05)。4、TANⅡa组外周血单核细胞中CD3、CD4、CD8阳性T细胞的比例明显低于Control组(P<0.05),TANⅡa+CsA组低于CsA组(P<0.05),TAN Ⅱa组与CsA组之间无统计学差异(P>0.05)。结论:TANIIa可以抑制同种异体皮肤移植后的免疫排斥反应,其作用机制在于其下调了IFN-γ、TNF-α、IL-2表达并降低了CD3、CD4、CD8阳性T细胞比例,同时上调了TGF-β1的表达。TANⅡa与CsA联合用药效果优于CsA。
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