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MarvelD1(MARVEL domain containing 1)是本实验室前期研究中获得的一个功能基因。基因表达分析的结果显示,MarvelD1基因表达在多种恶性肿瘤组织中都呈显著性下调的趋势,并且在MarvelD1基因低表达的肿瘤组织和癌细胞中,它的启动子区域会表现为一种高甲基化的情况。因此,MarvelD1基因被认为是潜在的肿瘤抑制基因。近年来,随着研究的不断深入,MarvelD1基因功能的认知也不断扩展。研究结果表明,MarvelD1不但在肿瘤的发生发展中起抑制作用,还可以通过调节ITGB1和ITGB4的表达平衡,进而影响肿瘤侵袭和转移。在MarvelD1基因敲除鼠的相关实验探究中也证实,MarvelD1不但在脑组织神经分化发育中发挥重要的作用,也在内胚层器官发育中起到了关键的调控作用。除上述已经了解的生物学功能以外,基于课题组前期构建的小鼠氧化应激模型,检测分析过程中发现,氧化应激刺激后的MarvelD1基因敲除老龄鼠(53周龄)脾脏与MarvelD1基因野生鼠相比,脾重存在显著降低的现象;更重要的是,氧化应激标志物检测结果提示,MarvelD1基因敲除鼠脾组织中,8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)与丙二醛(MDA)水平明显高于野生对照组,而且在氧化应激刺激后差异更加显著。考虑到脾脏在机体内发挥重要的免疫作用,并且具有造血与滤血功能,与机体健康状态息息相关。因此,本研究以MarvelD1基因敲除型小鼠作为主要研究对象,探究MarvelD1基因敲除对小鼠脾脏结构与功能的影响。课题前期利用已构建好的氧化应激模型进行检测分析发现,MarvelD1基因敲除鼠与野生型小鼠相比对应激刺激更加敏感,并且在氧化应激刺激之后MarvelD1敲除鼠的脾脏结构与T细胞数目均与野生型小鼠存在显著差异。为了进一步探究MarvelD1基因敲除是否对不同时间点的小鼠脾脏发育产生影响,本研究选择了3个不同发育时间点的小鼠,对其的脾指数,T淋巴细胞亚群数量以及比例平衡等情况进行分析。脾指数统计分析结果显示,不同发育时间点的两种基因型小鼠脾指数无显著差异;但值得注意的是,流式细胞仪分析结果显示,成熟阶段的18周龄MarvelD1基因敲除鼠脾脏中,CD8~+T细胞数目明显多于MarvelD1基因野生型小鼠,提示MarvelD1可能影响了敲除鼠脾脏中T细胞亚群的数量以及比例平衡关系。为了进一步阐明MarvelD1基因敲除后,小鼠脾脏结构和T淋巴细胞亚群数量平衡关系发生变化情况,以及对小鼠免疫功能的影响,本研究利用MarvelD1基因敲除鼠与野生型小鼠构建了李斯特菌感染模型,该模型可以更好的比较分析两种基因型小鼠在炎症反应发生过程中的免疫应答变化。流式细胞仪检测结果显示,MarvelD1基因敲除鼠在李斯特菌感染刺激后,CD8~+T细胞的数量显著增加,与野生型小鼠相比差异显著;另外,实时定量PCR检测结果表明,免疫相关的细胞因子在MarvelD1基因敲除鼠中的表达量均高于野生型小鼠。综上所述,本研究发现MarvelD1基因敲除后,影响了小鼠脾组织结构以及主要免疫功能细胞T淋巴细胞亚群的比例平衡关系,并且在感染刺激响应过程中MarvelD1基因与炎症因子的表达呈密切相关。由此提示,MarvelD1可能对机体免疫功能具有重要影响,其调控的分子机制仍需要深入探究。