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目的C型利钠肽(C-type natriuretic peptide,CNP)可通过旁分泌途径调控肾脏血管舒缩和细胞增殖。本研究通过观察CNP干预下人肾脏系膜细胞(Human mesangial cells,HMCs)体外增殖过程中基质金属蛋白酶及其组织抑制因子(matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases,MMPs/TIMPs)和细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的表达情况,探讨MMPs/TIMPs是否参与介导CNP对MCs胶原蛋白-IV(collagen,Col-IV)合成的抑制作用。方法本研究采用不同浓度CNP(0p M、10p M、100p M)对体外培养HMCs进行干预,观察24小时、48小时和72小时MMPs/TIMPs和ECM的表达情况。采用MTS比色法检测不同浓度CNP干预下HMCs吸光值,观察不同浓度CNP干预下HMCs增殖情况。采用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞上清液中CNP,MMP-2,MMP-9,TIMP-1及Col-IV的浓度。采用实时定量聚合酶链反应(real time PCR,RT-PCR)和蛋白印迹法(Western Blot,WB)检测细胞裂解液中CNP,MMP-2,MMP-9,TIMP-1及Col-IV m RNA及蛋白质表达。结果(1)10 p M和100 p M CNP对MCs增殖均有显著地抑制作用(P<0.05)。与10 p M CNP干预组相比,100 p M CNP可导致MCs活性在细胞培养后48和72小时分别降低11%和35%(P<0.05)。外源性CNP可使上清液Col-IV表达水平随时间推移而逐渐降低(P<0.05),且与低剂量组相比,高剂量组上清液Col-IV表达水平下降更为显著(P<0.05)。CNP可时间-剂量性抑制MCs增殖和胶原蛋白-IV(collagen-IV,Col-IV)表达;(2)CNP可显著抑制体外培养MCs MMP-2及MMP-9表达(P<0.05);(3)CNP干预后24小时和48小时,TIMP-1表达逐渐上调(P<0.05),而在72小时增幅减弱;(4)CNP与MMP-2及MMP-9表达呈显著负相关(分别为r=-0.770,P<0.05和r=-0.632,P<0.05);(5)CNP可导致MMPs/TIMPs表达失衡,在显著抑制MMP-2和MMP-9表达的同时,促进TIMP-1表达(P<0.05),CNP与Col-IV(r=-0.650,P<0.05)呈显著负相关,而与TIMP-1(r=+0.072,P>0.05)未见明显相关性。结论CNP在体外通过MMPs/TIMPs非依赖途径抑制MCs增殖及其ECM表达。