目的:肾细胞癌（Renal cell carcinoma,RCC）发生和发展及其舒尼替尼耐药潜在机制尚不清楚。本研究拟通过生物信息学方法探索肾癌的舒尼替尼耐药相关的基因,研究目标基因与肾癌患者的预后关系,进一步探究目标基因对肾癌细胞侵袭能力及肾癌细胞的舒尼替尼耐药性的影响,最后分析目标基因涉及的相关信号传导通路。方法与材料:本研究收集并分析了基因表达汇编数据库（Gene Expression Omnibus,GEO）的舒尼替尼耐药肾癌组织样本的2个芯片转录组数据,并筛选出差异表达基因（Differentially expressed gene,DEG）,利用在线数据库GEPIA对DEG进行泛癌分析,进一步筛选候选基因,再利用在线数据库HPA分析候选基因在肾癌中的表达情况并最终选定目标基因,构建目标基因的蛋白质-蛋白质相互作用（Protein-protein interaction,PPI）网络,识别与目标基因关系密切的核心基因,进行GO分析和KEGG通路分析。下载并分析TCGA的RCC患者的临床信息数据,进一步行RCC患者预后的单因素、多因素分析及生存分析,探究目标基因与RCC患者预后的关系。收集临床肾癌组织样本及癌旁正常肾脏组织,通过qRT-PCR、Western Blot技术分析目标基因在临床组织样本的表达情况。利用慢病毒转染技术建立目标基因低表达的786-0细胞系,并通过qRT-PCR、Western Blot检测目标基因的m RNA和蛋白质表达水平以验证建模是否成功,通过Transwell实验检测目标基因对于肾癌细胞株786-0的侵袭能力的影响,通过CCK8法检测目标基因对于肾癌细胞株786-0的增殖活性,进一步分析目标基因对肾癌细胞株786-0的舒尼替尼耐药的影响,最后通过相关性分析在线数据库TCGA的转录组数据,探究目标基因可能涉及的信号传导通路。结果:分析GEO的芯片数据结果提示,相较于舒尼替尼敏感的RCC样本,EPSTI1、OAS2、DUSP1、PLAUR、SIK1、CTGF在舒尼替尼耐药的RCC样本中高表达。GEPIA数据库泛癌分析提示EPSTI1在多种肿瘤中均存在显著高表达。HPA数据库的免疫组化图谱显示EPSTI1在肾癌中显著高表达。选取EPSTI1为目标基因,构建EPSTI1相关的蛋白-蛋白互作网络,筛选出核心基因,GO分析提示,EPSTI1及核心基因在分子功能方面主要是ATP结合、单链RNA结合等,细胞组成方面主要是细胞质等,生物过程层面主要是对病毒的防御反应、病毒基因组复制的负调控等。KEGG通路分析主要是甲型流感、趋化因子信号通路等。对于TCGA的RCC患者临床信息的单因素分析结果显示:高表达EPSTI1与患者的AJCC病理分期（HR,7.379;95%CI,5.281-10.312;P<0.001）和生存状态密切相关（HR,1.090;95%CI,1.052-1.129;P<0.001）,多因素分析提示:高表达EPSTI1是RCC患者不良预后的独立危险因素（HR,1.070;95%CI,1.028-1.114;P<0.001）,生存分析显示:相比于低表达EPSTI1的RCC患者,高表达EPSTI1的RCC患者具有更差的生存预后（P<0.0001）。qRT-PCR及Western Blot结果提示EPSTI1低表达的肾癌细胞786-0细胞系构建成功,Transwell实验提示:敲低EPSTI1的表达显著降低786-0细胞的侵袭能力（P<0.05）,CCK8实验结果提示:敲低EPSTI1的表达后,肾癌细胞786-0对舒尼替尼敏感性明显增加（P<0.05）,Pearson相关性分析:提示EPSTI1可能与JAK-STAT通路相关。结论:生信分析提示EPSTI1是RCC舒尼替尼耐药中主要的基因之一,进一步的分析表明EPSTI1在RCC组织中存在高表达,并且是RCC不良预后的独立危险因素。实验证实,敲低EPSTI1表达后,786-0细胞的侵袭能力减弱、对舒尼替尼耐药性明显缓解,其具体分子机制还有待进一步研究,EPSTI1未来或可作为抗肾癌治疗的新靶点。