兰花是兰科(Orchidaceae)植物的总称,是开花植物中最大的一个科,属于单子叶植物,是目前花卉中价值最高的一种。兰花的花色、花期和花形的改良一直是兰花育种的难点和重点。由于兰花比较难以进行遗传转化,并且兰科植物的花有许多独有的特征,因此进行兰花转基因的研究不仅可以为兰花分子生物学研究打下良好的基础而且还有很大的商业利用价值,在基础理论研究和实际应用方面都有很重要的意义。目前在兰花转化上进展缓慢,只在9个属的兰花转化上有过报道。 石斛属是兰科中第一大属,全球约有1600多种,其中多数种类具有观赏价值,称为石斛兰。石斛兰(Dendrobium)是热带兰中栽培比较广泛的名贵花卉,花型大,花枝长,花多,花色艳丽丰富,姿态优美,花瓶存活期长。本文以2种名贵的石斛兰品种(Dendrobium phalaenopsis Banyan Pink和Dendrobiumnobile)为材料,应用农杆菌介导的转化方法进行了遗传转化研究。为了改变兰花的花期和花色,我们利用RT-PCR方法从拟南芥中克隆了花分生组织决定基因AP1基因,将AP1基因克隆入植物表达载体pCAMBIA1301中转化石斛兰Dendrobium nobile,得到69个转基因株系,最高转化效率达到18.3%,并对转基因株系进行了GUS组织染色,结果表明GUS在转基因株系中得到了稳定表达;Southern杂交分子检测结果表明AP1基因被完整的整入到植物基因组中,为多拷贝插入,拷贝数1-4。同时我们从矮牵牛中克隆了查尔酮合酶基因CHSA基因,将CHSA基因构建入植物表达载体pWM101中转化石斛兰Dendrobiumpalaenopsis Banyan Pink,得到4个转基因株系,转化效率达到16.7%,并对转基因株系进行了分子检测。Southern杂交结果表明CHSA基因完整的整入到植物基因组中,为单拷贝插入。Northern杂交结果表明CHSA基因被转录了。目前两个品种都得到了生根的转基因苗。