化橘红多糖的提取纯化、体外抗氧化及生物活性的研究

来源 :江西农业大学 | 被引量 : 6次 | 上传用户:pizaiyang
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本试验以江西修水化橘红为原料,系统的进行化橘红多糖(ECP)微波提取工艺的研究,分离纯化方法的确定,体外抗氧化能力(DPPH、 OH、ABTS+、总还原力)的测定,以及其消炎、止咳、化痰药效的鉴定。研究的结果如下:1.对化橘红多糖的微波提取工艺进行研究,选取工艺参数—液料比、微波功率、微波温度、微波时间4个因素,分析其对多糖得率的影响。按试验设计做上述工艺参数的优化试验,采用Design-Expert软件对试验数据进行二次响应面分析。得出优化的微波萃取化橘红多糖的最佳工艺条件为液料比70,微波功率546.56W,微波温度100℃,微波时间22.32min,在该条件下化橘红多糖得率是24.64%。2.将微波提取得到的化橘红粉末经热水提取、乙醇沉淀、Savage法脱蛋白、透析得到粗多糖,测定其多糖含量为74.29%。粗多糖经DEAE-52纤维素阴离子交换层析柱分离,得到多糖含量分别为83.39%和85.77%的两个纯化组份ECP1和ECP2。通过凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography,GPC)-多角度激光光散射(Multi-angle Laser Light Scattering,MALLS)联用的方法来测定其分子量分别为34460和89690。3.采用化学法分别测定了粗多糖及其纯化组分的体外清除自由基(DPPH, OH,ABTS+)能力、还原能力。结果发现粗多糖及其两个纯化组分均具有较好的体外抗氧化清除自由基的能力,并且抗氧化能力与多糖浓度之间存在良好的相关性。其中ECP2的抗氧化清除自由基能力强于ECP和ECP1。4.通过采用二甲苯耳廓肿胀致炎法观察消炎作用;小鼠浓氨水引咳法观察止咳作用;小鼠气管段酚红排泌法观察化痰作用。结果表明化橘红多糖对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀有不同程度的抑制作用,其中化橘红多糖低、中、高剂量组的肿胀抑制率分别为24.93%、34.84%和48.72%,阿司匹林阳性对照组的肿胀抑制率为52.83%;化橘红多糖能明显的延长小鼠的咳嗽潜伏期及减少2min内的咳嗽次数,其中化橘红多糖高剂量组显著降低了小鼠2min内的咳嗽次数,其效果好于磷酸苯丙哌林片阳性对照组;与空白对照组酚红排泌量相比,化橘红中、高剂量组及阳性对照组都显著提高了小鼠气管段酚红的排泌量。说明化橘红多糖具有较好的消炎、止咳及化痰作用。
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