拟南芥SFL基因家族全基因组分析和一个茎端分生组织正向调控因子SAA的功能分析

来源 :中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:D243435dsfsdfqwe
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目前的研究表明,金鱼草S位点F-box基因,AhSLF-S2,在S核酸酶介导的自交不亲和反应中控制花粉部分的功能。该基因的分离导致了一个植物特异的基因家族被发现,被称作SLF(S位点F-box)家族。这个家族的成员众多,来源广泛,很多成员来自的物种没有核酸酶介导的自交不亲和系统。为了研究这个家族中来自拟南芥的众多成员的进化关系和功能,我们首先鉴定出拟南芥中有92个F-box蛋白属于这个基因家族,并称其为AtSFL(S-locusF-box-like)。进化树分析该家族所有成员表明,这个家族可以被分为5类。其中,所有的SLF蛋白可能具有单一起源。酵母双杂交分析表明大多数AtSFL蛋白可以同一个或数个ASK(ArabidopsisSkp1-like)蛋白相互作用。鉴于ASK蛋白是SCF(Skp1/CullinorCDC53/F-box)复合物的重要组分,因而许多AtSFL蛋白可能在泛素/26S蛋白小体介导的蛋白质降解途径中发挥功能。对这92个基因的转录分析表明许多AtSFL基因在所检测的四个重要组织:根,叶,花序,角果中均表达,其中只有三个基因呈现组织特异性,它们是AtSFL24,61和79。与此同时,我们获得了37个基因的T-DNA插入株系,观察这些株系的表型发现,除了两个基因(AtSFL61和70)的失活可能导致胚或雌配子体发育缺陷,其它的株系在正常生长状况下没有明显的表型变化,这表明这些基因间可能存在功能冗余。总之,我们的结果表明拟南芥AtSFL蛋白的表达和功能模式多样,可能在多种生物途径中发挥重要功能。这部分工作是与董丽同学共同完成的。 AtSFL79是AtSFL基因家族中S类的一个成员,异位过量表达该基因的许多植株中出现了两个顶端分生组织,因此我们将该基因命名为SAA(SiAmeseArabidopsis)。原位杂交显示该基因在发育中的胚和子叶期的顶端分生组织(SAM)以及花粉中表达,但是在花序分生组织中不表达。Pull-down分析证明,SAA蛋白可以形成SCF复合体。SAA基因功能丧失后表现为茎生叶的节间与莲座叶的节间相同,植物趋向于维持营养生长,但是生殖生长没受影响,说明SAA基因具有促进顶端分生组织向花序分生组织转变的作用。扫描电镜观察发现,异位表达植株的顶端分生组织比野生型的面积大,提示与两个或多个顶端分生组织的产生有关。这些结果表明SAA基因对于SAM维持正常功能起正向调控的作用。
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