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Serratia plymuthicaA21-4是从洋葱根际土壤中分离的具有定殖能力强、对病原菌的拮抗活性高、促生效果显著、诱导抗性等优良特性的PGPR菌株。为进一步确认A21-4对田间辣椒的促生效果和诱导抗性效果,并解释其促生长和诱导抗性机制,本研究在田间栽培条件下,研究A21-4菌株对辣椒生长发育和根际土壤微生态环境的影响,分析其促生长机制;在田间自然发病和人工接种条件下,测定辣椒疫病和炭疽病的发病程度,进一步确认A21-4对辣椒的诱导抗性效果;同时,测定田间辣椒防御相关酶和PR蛋白活性,并进一步采用RT-PCR和Real-time PCR技术,测定诱导系统抗性信号转导途径关键调节基因的表达量,分析其诱导抗性信号转导途径和诱导抗性机制。结果如下: 1、在田间栽培条件下,A21-4处理能显著提高辣椒成株期的茎粗、叶绿素含量和根系活力,各比对照提高23.66%、56.26%和50.32%~237.13%;显著增加辣椒产量,增产率达到44.55%;能显著提高辣椒果实的蛋白质、维生素c和硝态氮的含量,分别提高29.32%、53.97%和129.84%。 2、A21-4菌株在田间辣椒生育期间,在辣椒根系和根际土壤中保持较高的定殖密度,并显著提高辣椒根际土壤酶活性和速效氮磷钾的含量,调节土壤微生态环境。以108 cfu·mL-1浓度的菌液处理幼苗后移栽时,A21-4在辣椒根系和根际土壤中的定殖密度均维持在105 cfu·g-1以上;A21-4处理的根际土壤过氧化氢酶、脲酶和磷酸酶活性分别比对照提高22.95%~32.31%、24.32%~94.11%和49.41%~271.74%,A21-4处理的辣椒根际土壤速效氮磷钾含量分别比对照增加7.60%~49.25%、7.24%~17.93%和12.70%~25.61%;A21-4处理可显著增加辣椒根际土壤细菌和放线菌数量,减少真菌数量。 3、在田间自然发病和人工接种条件下,A21-4能显著诱导辣椒对疫病和炭疽病的抗性。离体人工接种时,A21-4在空间隔离的辣椒叶部和果实上对辣椒疫病的防治效果分别达32.30%和52.16%,在果实上对辣椒炭疽病的防治效果达到42.97%;在田间自然发病条件下, A21-4对辣椒炭疽病的防治效果达到62.10%。 4、A21-4显著提高田间辣椒叶部的防御相关酶和PR蛋白活性。A21-4处理的田间辣椒体内POD、PAL和PPO的活性分别比对照提高了330.88%、14.93%和68.18%;β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶的活性分别比对照提高了23.13%和224.19%。初步推断,A21-4的诱导抗病性与辣椒体内POD、PAL、PPO、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶活性的提高密切相关。 5、采用RT-PCR和Real-time PCR技术测定诱导系统抗性信号转导途径关键调节基因的表达量,结果显示,A21-4处理诱导SA信号转导途径下游标记基因NPR1和PR1的超量表达,而JA/ET途径下游标记基因PDF1.2有微量表达或不表达,且显著增加SA信号转导途径相关的CaCYP1基因和SA、ET途径相关的CaBPR1基因的表达量,而与JA、ET途径相关的CaPR4基因和SA、JA和ET途径相关的CaPR10基因的表达量与对照无明显差异,且与ET途径相关的CaTin1基因未检测到。由此初步判断,A21-4诱导的辣椒系统抗性主要依赖于SA途径,而独立于JA/ET途径。 6、采用高效离子色谱分析辣椒内源水杨酸的含量,结果显示,A21-4处理显著增加辣椒内源水杨酸的含量,处理24 h开始增加,处理72 h时出现峰值,比对照增加458.29%。可见,A21-4诱导的辣椒系统抗性依赖于SA途径。