【摘 要】
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畜牧业是内蒙古第一支柱产业。某些家畜品种如蒙古羊虽肉质好,但个体生产水平较低,产羔数少,多为单胎,与国际优良品种还存在很大差距,如何增加其双胎或三胎率是一研究热点。本文通过从繁育纯合小鼠筛选6-8周龄小鼠,提取其DNA进行PCR扩增目的基因片段,鉴别小鼠的基因型;通过Western blot、石蜡组织切片、RT-qPCR法分析并比较武藏蛋白（Musashi,MSI）基因敲除纯合小鼠及野生型小鼠在下
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畜牧业是内蒙古第一支柱产业。某些家畜品种如蒙古羊虽肉质好,但个体生产水平较低,产羔数少,多为单胎,与国际优良品种还存在很大差距,如何增加其双胎或三胎率是一研究热点。本文通过从繁育纯合小鼠筛选6-8周龄小鼠,提取其DNA进行PCR扩增目的基因片段,鉴别小鼠的基因型;通过Western blot、石蜡组织切片、RT-qPCR法分析并比较武藏蛋白（Musashi,MSI）基因敲除纯合小鼠及野生型小鼠在下丘脑、海马、卵巢中MSI2蛋白的表达。同时,将MSI2基因敲除纯合小鼠和野生型小鼠的卵巢用于转录组测序,观察其在RNA水平上的变化。结果表明:MSI2基因敲除小鼠产仔数随胎次增加,第三胎时产仔数较野生型小鼠多62.5±8.3%,平均为13只。敲除MSI2基因的纯合子小鼠较野生型小鼠在下丘脑和卵巢中MSI2蛋白表达量多,在海马中MSI2表达蛋白量少。利用KRT14Cre/+::Rosa26Isl-Tom/+小鼠进行全脑定位,发现KRT14与MSI2主要在小鼠海马CA3及附近区域中存在共表达。KRT14Cre/+::MSI2Flox/Flox嵌合小鼠较对照组小鼠海马中MSI2蛋白表达明显降低,卵巢中表达明显升高。转录组测序共获得36.73 Gb Clean Data,各样品Clean Data均达到5.64 Gb,Q30碱基百分比在94.22%及以上。分别将各样品的Clean Reads与指定的参考基因组进行序列比对,比对效率从96.70%到97.14%不等,分析发现MSI2基因敲除小鼠与野生型小鼠卵巢中的MSI2基因表达未见明显异常,具体差异有待进一步研究。综上,推测MSI2通过海马调控性腺激素分泌导致排卵增多,产生超多胎,同时海马可能为MSI2调控超多胎的潜在主效核团。
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