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本论文旨在从联苯降解菌Dyella ginsengisoli LA-4中纯化一种新型外二醇双加氧酶BphC,进行纯酶特性考察;重组酶BphC固定化方法的考察;优化以海藻酸钠为载体固定重组酶BphC的条件。从菌株LA-4中纯化一种新型天然酶BphC,并进行纯酶特性考察,包括:酶促反应动力学、pH值、温度、金属离子及抑制剂对纯酶活性的影响等。研究发现:该酶是Fe（Ⅱ）依赖型2,3-二羟基联苯1,2-双加氧酶,分子量约为34±1kDa;N端氨基酸测序结果为Ser-Val-Lys-Asn-Leu-Gly-Tyr-Met-Gly-Phe-Ser-Val-Lys-Asp-Val;从细胞粗提物到纯酶,纯化倍数为13.82,酶活性回收率为8.76%;BphC可氧化2,3-二羟基联苯、3-甲基邻苯二酚、4-甲基邻苯二酚、邻苯二酚和4-氯邻苯二酚,对应的比酶活分别为:95.20、14.37、0.15、3.64和0.53U/mg;BphC对2,3-二羟基联苯亲和力最大;底物为2,3-二羟基联苯时,该酶最适pH值为8.0,最适温度为20℃;3-甲基邻苯二酚和4-甲基邻苯二酚做底物时,该酶最适温度分别为30和20℃;一些金属离子和抑制剂（抗坏血酸、SDS和过氧化氢）能够明显抑制天然酶BphC的活性。以活性炭、强碱性阴离子交换树脂、海藻酸钠、聚乙烯醇和ZnO溶胶-凝胶基质为载体,均可以成功固定重组酶BphC。选择苯甲酸和苯胺为底物时,载体固定化效果顺序为:海藻酸钠＞ZnO溶胶-凝胶基质＞聚乙烯醇。投加活性炭为载体固定化酶可以提高苯甲酸和苯胺降解率,但主导作用是活性炭对底物的吸附作用。投加强碱性阴离子交换树脂为载体固定化酶可以提高苯甲酸降解率,但主导作用是树脂对苯甲酸的吸附作用,而该固定化酶对苯胺降解影响很小。应用表面响应法优化了以海藻酸钠为载体固定化重组酶BphC的条件,考虑了四个主要影响因素:海藻酸钠浓度、CaCl2浓度、加酶体积和固定化时间。研究发现:联苯降解率与上述四个影响因素不是简单的线性关系,由Analysis模块拟合出了方程。模型显著性较好,拟合值和真实值之间的符合程度较好。通过Optimization Numerical Solution求最优解,结果为海藻酸钠浓度3.68%,氯化钙浓度3.72%,加酶体积1.08mL,固定化时间5h,对应的联苯降解率为99.27%,而实际测得的联苯降解率为99%,与预测值符合程度较好。