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刺血疗法又称为刺络泻血疗法,是针灸传统方法之一,是指用一定的针具(如三棱针、采血针等)针刺某些穴位或者刺破体表的血络来治疗疾病的一种方法。基于《黄帝内经》中刺络泻血疗法可以祛瘀通络、调和气血,调整脏腑功能的作用,笔者导师在临床中利用刺络泻血疗法治疗肝纤维化有显著疗效,结合相关文献记载,设计本实验,通过观察刺血疗法对肝纤维化大鼠HA、LN的影响,来探讨刺血疗法防治肝纤维化的作用机制,以期为临床治疗肝纤维化提供一种新的思路和方法。本论文分为文献研究和实验研究两部分:第一部分为文献研究,包括综述两篇,综述一从现代医学的角度,对肝纤维化的基本特点、发病机制、诊断治疗方法来探讨肝纤维化的现代医学研究进展,综述二从祖国医学的角度,从肝纤维化的古代病名、病因病机及其治法原则,来总结中医学对肝纤维化的认识。第二部分为实验研究:研究目的:本实验以四氯化碳诱导法建立肝纤维化大鼠模型,在造模成功后,以刺络泻血疗法刺破大鼠足三里、太冲、阳陵泉附近浅表静脉,使之出血,并以秋水仙碱作为药物对照组,观察刺络泻血疗法对肝纤维化大鼠血清透明质酸、层粘蛋白和肝组织病理的影响,探讨其抗肝纤维化的疗效及其作用机制。研究方法:选用SD雄性大鼠48只,随机分为4组:正常组,模型组,刺血组,秋水仙碱组,每组12只。正常组颈后皮下注射0.9%氯化钠溶液,其余3组分别颈后皮下注射40%CCL4(花生油稀释)诱导肝纤维化模型,从第7周开始,刺血组从大鼠后肢足三里、太冲、阳陵泉附近浅表静脉处刺络泻血,每次出血量为(体重×7.4%×2%)/2,2次/周;药物组给予秋水仙碱灌胃,200 μg/kg/d,5次/周,至12周。第12周末时以10%水合氯醛麻醉大鼠,腹主动脉取血5 ml,进行谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和肝纤维化指标透明质酸(HA)、层粘蛋白(LN)检测,剖取肝叶行HE染色,观察肝脏组织的病理形态学改变。研究结果:1模型组与正常组比较,大鼠肝功能指标AST、ALT含量显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,经治疗,刺血组和秋水仙碱组大鼠肝功能指标AST、ALT含量不同程度降低(P<0.05);刺血组与秋水仙碱组比较,指标含量无明显差异,不具有统计学意义(P>0.05);2模型组与正常组比较,大鼠血清肝纤指标HA、LN含量显著升高,差异具有统计学意义(P<0.01);经治疗,刺血组和秋水仙碱组大鼠血清HA、LN与模型组比较含量显著降低(P<0.05);刺血组与秋水仙碱组比较,指标含量无明显差异,不具有统计学意义(P>0.05);3肝组织病理学:正常组肝小叶结构完整,肝细胞围绕中央静脉呈放射状排列,无坏死,无炎细胞浸润,少量胶原被染色;模型组肝小叶结构破坏,肝细胞排列紊乱,可见大量脂肪变性,肝脏汇管区扩大,纤维结缔组织增生明显,将肝小叶包绕成大小不等的肝细胞团,部分形成假小叶,并可见炎细胞浸润;与模型组相比,刺血组和秋水仙碱组经治疗,肝小叶结构较清晰,纤维结缔组织增生均有不同程度的改善,少量的细胞脂肪变性。研究结论:1.刺络泻血疗法能有效降低CCL4诱导的肝纤维化大鼠肝功ALT、AST水平,并降低HA、LN的含量,其效果与西药秋水仙碱作用相当,同时可以改善肝纤维化大鼠肝组织病理变化,减轻肝损伤。2.本实验结果提示,刺络泻血疗法具有改善肝损伤、阻止肝纤维化进一步发展并能逆转肝纤维化的作用,其作用机制可能与刺络泻血疗法能抑制肝星状细胞活化或促进其凋亡来降低血清中细胞外基质(ECM)的含量有关。