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当前体外组织构建技术在构建厚度大于2mm、细胞含量高、细胞和基质均布性好的工程化组织方面仍具挑战性.本研究提出了一种基于微载体的新型体外组织构建方法即组织微构.重塑技术,选择人成纤维细胞(HF)作为模式种子细胞,大孔Cytopore微载体作为模式载体,对组织微构.重塑技术用于体外构建工程化组织的基本过程和共性问题进行了认识和探讨.
研究结果表明:当Cytopore浓度为2mg/mL、细胞接种密度为2×105cells/mL,并采用间歇搅拌接种,连续搅拌和换液培养方式构建微构组织时,培养20d后微构组织最高细胞密度达16.4×107cells/cm3:32d.后,所形成的微构组织整体均质性好、细胞活性高、胞外基质生成丰富、Ⅰ型胶原分布广泛.微构组织形成过程随时间发生动态聚团变化;微构组织聚团的形成依赖于细胞桥接和胞外基质沉积:Cytopore浓度越大越有利于微构组织聚团;改变细胞接种密度可以调整微构组织聚团变化的时序性;通过Aseorbicacid-2-P提高胞外胶原基质的分泌沉积量,能显著促进微构组织聚团;提高Cytopore浓度或通过Ascorbic acid-2-P提高胞外胶原基质的分泌沉积可以降低微构组织聚团发生突跃对单位微球载荷细胞量的要求.利用灌注再装配的方法能够将微构组织重塑成大尺寸(厚度≥5mm)的、规则几何形状的、一定机械力学性能的、内部细胞和基质分布较均匀的宏构组织;与传统组织构建技术相比,组织微构.重塑技术能获得高密度组织构建物,其内部细胞和基质分布较均匀,且细胞密度受构建物厚度影响较小.
因此,组织微构.重塑技术是一种行之有效、富有潜力的体外组织构建方法,为解决当前体外大尺寸组织构建所面临的挑战提供新的思路和可能,为缺损和病变组织的修复诊治提供新的方案.