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乳腺癌是当今社会威胁女性健康及生命的重要疾病之一。随着社会的发展、人们生活水平的提高和生活方式的改变,乳腺癌在女性中的发病率也呈逐年上升的趋势。与正常细胞相比,癌变细胞的骨架结构、表面形貌和力学性质等会发生不同程度的改变,这些变化与病变细胞内发生的复杂生理过程密切相关。同时,癌瘤组织中的细胞外基质成分,如胶原、纤维连接蛋白等的构成也会随病变的发展,产生一定的变化。阐明细胞弹性的变化与肿瘤组织基质成分变化的关系,对于解释肿瘤进程具有重要意义。上世纪八十年代出现的原子力显微镜(Atomic Force Microscope, AFM)可以在液体环境下,以极高的灵敏度和分辨率对活体细胞进行表面形貌成像及力学性质检测,同时结合免疫荧光观察等检测手段,可以准确观察细胞形貌表象、细胞生理过程变化等。随着AFM性能的优化和升级,其在生物医学领域的应用范围愈加广泛,在细胞生物力学研究,如细胞弹性的测量等方面具有极佳的应用前景。本文主要的研究内容和结果为:(1)使用AFM检测原代乳腺癌细胞及正常乳腺细胞弹性发现,同一病人乳腺癌细胞与正常细胞的弹性差异显著,原代乳腺癌细胞的硬度远低于正常乳腺细胞。(2)分析I型胶原(Collagen I, Col I)及纤维连接蛋白(Fibronectin, FN)对乳腺癌MCF-7及MDA-MB231细胞粘附及铺展状态的影响。用相同浓度的基质蛋白包被玻片,于不同时间段观察并统计细胞粘附量及铺展面积的变化。结果显示,以上两种乳腺癌细胞于Col I上的粘附量及铺展面积明显高于FN。(3)通过细胞骨架成分F-actin鬼笔环肽染色发现,MCF-7及MDA-MB231两种细胞在Col I上的丝状结构明显,排布较规则;尤其是MDA-MB231在Col I上细胞边缘胞膜区域F-actin呈亮带分布。(4)通过MTT法及细胞划痕法实验结果显示,MCF-7和MDA-MB231在FN上的增殖速度高于在Col I上;同样,二者在FN包被环境下的迁移速度也高于在Col I上。进一步,使用含Syndecan-1及Syndecan-4抗体的培养基培养MCF-7和MDA-MB231,发现Syndecans抗体抑制了FN对增殖和迁移的促进作用。(5)随后,我们又利用AFM测定了MCF-7及MDA-MB231在Col I和FN两种基底上硬度的变化情况。实验发现,MDA-MB231在Col I上的杨氏模量明显高于在FN上的;相反地,MCF-7在Col I上的杨氏模量明显低于在FN上。(6)秋水仙碱及细胞松弛素D通过破坏乳腺癌细胞骨架不同成分,使乳腺癌细胞细胞弹性明显下降。