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目的卵巢癌是严重威胁妇女生命健康的恶性肿瘤,其死亡率占妇科肿瘤的首位。大约70%的卵巢癌病人在就诊时已有局部或远处的转移灶症状,近十几年来,手术加化疗的治疗方案,未能提高患者的总体生存率,因此妇科肿瘤专家不得不寻求早期诊断方法和新的治疗方案。近年来研究发现,趋化因子及受体与肿瘤细胞的增殖、分化、侵袭、转移等恶性表现有重要关联,尤其是趋化因子SDF-1(stromal cell-derived factor 1)及其受体CXCR4相互作用构成的反应轴越来越受到人们的关注。为探索SDF-1/CXCR4生物学轴(SDF-1/CXCR4 biological axis)对卵巢癌细胞生物学行为的影响,我们以人卵巢癌细胞株SW626、Anglne为研究对象,检测了趋化因子受体CXCR4的表达情况并探讨SDF-1/CXCR4生物学轴对卵巢癌细胞增殖、凋亡和迁移的作用,从而找到一种新的抑制卵巢癌的治疗策略。材料和方法一、细胞株:人卵巢癌细胞系SW626和Anglne购于中国典型培养物保藏中心(武汉大学)。二、材料:培养基DMEM、RPMI-1640、RNA提取试剂TRIzol(美国Gibco公司),新生小牛血清(美国Hyclone公司), AMV逆转录酶、聚合酶链反应Taq酶(日本Takara公司), MTT(噻唑蓝)、DMSO(二甲亚砜)、PI(碘化丙啶)(美国Sigma公司),SDF-1α(美国PeproTech公司),抗CXCR4单克隆抗体(Ig2b44716clone)(美国R &D公司),Matrigel人工基底膜胶(美国BD公司),体外微孔隔离室板(Transwell,装有多聚碳酸酯微孔膜,8μm孔径,美国Costa公司)。三、方法1、SW626细胞培养于含20%新生小牛血清的DMEM培养基中,Anglne细胞培养于含10%新生小牛血清的RPMI-1640培养基中,两株均在37℃5%CO2的饱和湿度下培养,每两天换液一次,0.25%胰蛋白酶消化传代。2、应用RT-PCR,检测人卵巢癌细胞系SW626和Anglne中趋化因子受体CXCR4的表达。3、应用MTT方法检测趋化因子SDF-1α及抗CXCR4单克隆抗体对SW626和Anglne细胞增殖的影响。4、应用流式细胞技术检测趋化因子SDF-1α及抗CXCR4单克隆抗体对SW626和Anglne细胞细胞周期和凋亡的影响。5、体外微孔隔离室板(Transwell)检测在SDF-1α作用下卵巢癌细胞的趋化活性和侵袭活性及CXCR4的封闭对卵巢癌细胞趋化活性和侵袭活性的影响。四、统计学方法:数据使用均数±标准差表示。数据分析使用t检验。P<0.05被认为具有统计学意义。结果一、CXCR4 mRNA在卵巢癌SW626细胞呈阳性表达,Anglne细胞未检测到CXCR4 mRNA表达。二、对于SW626细胞,100ng/ml SDF-1α对其增殖没有明显影响(吸光度值A=0.796),与对照组(A=0.774)比较没有显著性差异;20μg/ml抗CXCR4单克隆抗体对其增殖有明显的抑制作用(A=0.520),与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。对于Anglne细胞,SDF-1α和抗CXCR4单抗对其增殖没有明显影响(P>0.05)。三、SW626细胞,100ng/ml SDF-1α对其细胞周期和凋亡没有明显影响(增殖指数PI=(62.3±2.8)%,凋亡指数AI=(14.5±0.9)%),与对照组比较没有显著性差异(PI=(61.6±2.4)%,AI=(14.7±1.7)%);20μg/ml抗CXCR4单克隆抗体明显降低其增殖指数(PI=(37.5±1.1)%),与对照组比较有显著性差异(P<0.05),对其凋亡没有明显影响(AI=(13.3±1.4)%)。对于Anglne细胞,SDF-1α和抗CXCR4单抗对其细胞周期和凋亡没有明显影响(P>0.05)。四、100ng/ml SDF-1α可促进SW626细胞的趋化和侵袭,其趋化指数(CI)和侵袭指数(II)分别为3.1±0.5和3.8±0.4,与对照组比较有显著性差异(P<0.05);20μg/ml抗CXCR4单克隆抗体对CXCR4的封闭能抑制SW626的这种趋化活性和侵袭活性,其抑制率分别为68.6±7.7%和73.1±3.3%,与对照组比较有显著性差异(P<0.05)。SDF-1α和抗CXCR4单抗对Anglne细胞的趋化活性和侵袭活性没有明显影响(P>0.05)。结论一、卵巢癌SW626细胞表达趋化因子受体CXCR4 mRNA,Anglne细胞未检测到CXCR4 mRNA表达。二、抗CXCR4单克隆抗体对CXCR4表达阳性的卵巢癌细胞增殖有明显的抑制作用,SDF-1对其增殖没有明显影响。三、趋化因子SDF-1可促进CXCR4表达阳性的卵巢癌细胞趋化和侵袭活性,CXCR4的封闭能抑制这种趋化和侵袭活性。四、趋化因子SDF-1及其受体CXCR4的相互作用可能在卵巢癌细胞增殖和转移中发挥重要作用,干扰SDF-1 /CXCR4的相互作用可能成为肿瘤治疗的一个有意义的靶点和策略。