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禽腺病毒(FAdV)属于腺病毒科禽腺病毒属,是一种无囊膜的双链DNA病毒。根据免疫原性差异,分为三个亚群,其中流行最广且研究最多的Ⅰ群腺病毒(FAdV-Ⅰ)分为5个属和12种血清型,包括种属A(血清1型)、种属B(血清5型)、种属C(血清型4、10)、种属D(血清型2、3、9、11)和种属E(血清型6、7、8a、8b)。目前我国80%的FAdV分离株与血清4型(FAdV-4)相关,FAdV-4是鸡心包积液综合征(HPS)的病原体,引起以心包积液和包涵体肝炎为特征的急性传染性疾病,自2015年首先在我国鸡群中爆发后,随后在鸭群中也报道感染FAdV-4,目前广为流行,常与鸭圆环病毒、鸭肝炎病毒、鸭坦布苏病毒等发生混合感染,严重威胁养鸭业健康发展。为调查山东地区鸭群中FAdV的流行状态,探究不同来源腺病毒对雏鸭的致病性,本研究对2019-2020年山东省中西部8个地区21个鸭场收集临床样品237份进行病原检测、分离鉴定,扩增分离毒株六邻体(Hexon)基因进行遗传进化和氨基酸位点突变分析,利用蚀斑试验和高通量测序纯化鸭源FAdV(命名为CHSD-2),分析其全基因组序列,并对鸭群腺病毒传染源进行初步溯源调查,在山东省多地种鸭场随机采集18批次93只1日龄雏鸭及鸭场防疫所用的鸡源卵黄抗体16份进行病原检测。随后对分离的鸭源FAdV-4与鸡源FAdV-4进行致病性比较研究,通过体内外感染试验,对病毒的增殖、炎性因子m RNA的表达水平、血清抗体水平、组织器官的损伤反应等进行系统研究。调查结果显示,237份样品中,有68份检测到FAdV,阳性检出率为28.69%;冬、夏季节FAdV阳性检出率较高。本研究共分离到16株鸭源FAdV,全部为FAdV-4;所有分离毒株均与鸡源FAdV-4高度同源,与参考毒株的Hexon蛋白氨基酸同源性为99.1%~99.9%,仅有个别氨基酸发生突变,分离毒株间的Hexon氨基酸同源性为98.6%~100%;纯化的分离毒株CHSD-2基因组全长为43724 bp,与鸡源FAdV-4参考毒株的全基因组核苷酸同源性为100%。FAdV的溯源调查结果显示,随机选取的山东地区种鸭场的93只1日龄雏鸭均未检测到FAdV,16份粗制鸡卵黄抗体中9份检测到FAdV,阳性率高达56.35%。在体外感染实验中通过荧光定量检测病毒载量,发现鸭源和鸡源FAdV-4均可在鸡肝癌细胞内大量复制且相差不大,而在鸡原代成纤维细胞、鸭原代肝细胞、鸭原代成纤维细胞内的增殖效率较低,但总体来说两株病毒在肝源细胞上的增殖能力强于成纤维细胞。体内感染实验表明,鸭源和鸡源FAdV-4通过肌肉注射感染抗体阴性雏鸭,鸡源FAdV-4感染组可引起雏鸭精神沉郁,两感染组均无死亡现象;剖检可见两感染组雏鸭有多少不等的淡黄色心包积液,肝脏呈土黄色,稍肿胀,未见坏死灶或出血点,鸡源FAdV-4感染组脾脏呈暗红色稍显肿大;病理组织学观察发现,两感染组均可引起肝细胞颗粒变性及脂肪变性,大脑均可见脑组织充血,少量胶质细胞增生。鸭源FAdV-4感染组脾脏有部分淋巴细胞缺失,异嗜性粒细胞浸润;两感染组的脾脏、法氏囊、胸腺的免疫器官指数均以前期高于对照组,后期低于对照组为特点;利用荧光定量检测组织病毒载量,显示肝脏内病毒拷贝数明显高于其他组织,鸡源FAdV-4感染组于攻毒后第3天达到病毒载量峰值,鸭源FAdV-4感染组则在感染后第7天达到峰值,之后骤降;通过对两感染组雏鸭肝脏和心脏的免疫因子m RNA水平进行检测,发现两感染组的肝脏和心脏中IRF-1、IRF-7、IFN-βm RNA的表达水平相对于对照组均有下调,而两病毒在感染肝脏后第3-5d上调IFN-γ。在感染过程中,两感染组均未引起肝脏中炎症因子(IL-1β、IL-2、IL-6、IL-8)上调,反而在心脏中的炎症因子上调表达。通过对山东部分地区鸭源腺病毒的分离鉴定及与鸡源腺病毒体内外感染致病性比较研究显示,山东部分地区存在高比例的FAdV-4感染,且多与其他病原混合感染,鸭群FAdV-4流行株与鸡群流行株高度同源,鸭群腺病毒传染源可能与带毒的鸡卵黄抗体的滥用密切相关。鸭源、鸡源FAdV-4主要侵害雏鸭肝脏,但不形成包涵体。在体外对鸡肝癌细胞具有较强的感染致病性,对鸡、鸭原代细胞的感染致病性较低。