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目的甲型流感是一种高传染性急性呼吸道传染病,给世界造成极大的经济及医疗负担。尽管现在已有一批对流感行之有效的药物,但对流感的药物耐药性问题日益增多。很多中药、方剂对甲流都有一定的防治作用,本文旨在评价潘高寿川贝枇杷膏对流感病毒的防治作用。方法1.鸡胚培养法观察药物对甲流病毒的防治作用:以不同浓度的药物对流感病毒感染鸡胚进行药物干预进行预防及治疗实验,以0.5%鸡血红细胞对鸡胚尿囊液进行血凝实验,判断药物对流感病毒感染鸡胚的药效。2.细胞培养法观察药物对甲流病毒的防治作用:以狗肾细胞(MDCK细胞)为实验细胞,MTT法测定药物对MDCK细胞的毒性,血凝法判断药物对流感病毒的抑制作用。3.采用流感病毒肺损伤模型观察药物对流感感染小鼠的防治作用:以病毒滴鼻感染小鼠,观察药物对模型小鼠的死亡保护率、肺指数及病理,评价药物对甲型流感病毒的防治作用。4.酶联免疫吸附实验(Elisa)测定药物对流感感染小鼠鼠肺肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1 β)及干扰素γ(IFN-γ)含量的影响。5.酶联免疫吸附实验测定药物对流感感染小鼠鼻咽冲洗液、肺泡灌洗液、肠道冲洗液中分泌性抗体(SIgA)及血清IgG含量的影响。结果1.毒性试验中,潘高寿川贝枇杷最大受试验浓度430mg/胚对鸡胚有明显毒性;215mmg/胚剂量下鸡胚均为活胚,根据该实验结果确定后续抗流感病毒实验中潘高寿川贝枇杷膏的起始实验剂量为172mg/胚。抑制作用中,潘高寿川贝枇杷膏对流感病毒有一定的预防作用(高、低剂量对甲型流感病毒有50%、16.7%的抑制作用)与较好的治疗作用(高中低剂量对甲型流感病毒分别有100%、83.33%及33%的抑制作用,且存在量效关系。2.利用Reed-Muench法计算所得,川贝枇杷膏在MDCK细胞上对半数毒性浓度为57.68mg.mL-1。根据实验结果,选择80%的TC50作为后续实验浓度,即40mg·mL-1作为后续抗流感病毒体外药效实验浓度。对病毒的抑制实验,预防作用中,川贝枇杷膏在有毒剂量 40mg·mL-1,及无毒剂量 20mg·mL-11、10mg·mmL-1、5mg·mL-1、2.5mg·mL-1、1.25mg·mL-1下仍能抑制病毒对红细胞的凝集作用;在治疗作用中,川贝枇杷膏在有毒剂量40mg.mL-1及无毒剂量20mg.mL-1和10mg.mL-1下能抑制流感病毒对红细胞的凝集作用。3.川贝枇杷膏能能抑制因病毒性肺炎引起的肺指数增加,与病毒对照组相比差异具有统计学意义(高剂量P<0.01,中剂量P<0.05),且表现出量效关系。川贝枇杷膏对流感感染小鼠能起到一定的死亡保护作用,提高存活率,与病毒对照组相比差异有统计学意义(高剂量P<0.05)。贝枇杷膏能减轻流感感染小鼠肉眼及光镜下的病理评分,改善肺损伤。与病例对照组相比差异有统计学意义(高剂量肉眼观评分P<0.01,镜下评分P<0.05)。光镜下,高剂量组小鼠肺组织肺泡壁完整,肺泡腔炎性渗出细胞少,上皮细胞脱落轻微,肺间隔未见塌陷、增厚,淋巴细胞、中性粒细胞浸润轻微,血管未见明显充血。细气管腔内未见明显炎细胞渗出,未发病区肺泡未见代偿性肺气肿产生,中低剂量介于病毒对照组及高剂量之间。4.与病毒对照组(模型组)相比,给药川贝枇杷膏后能改善流感感染小鼠肺内细胞因子浓度(降低肺内TNF-α,高中剂量P<0.01,低剂量P<0.05;降低IL-1 β,高剂量P<0.05;提高IFN-γ,P<0.05),差异具有统计学意义。5.川贝枇杷膏干预流感病毒感染小鼠能提高小鼠分泌抗体的量,升高差异与病毒对照组相比有统计学意义,尤以高剂量组最为显著。肺泡灌洗液SIgA(高剂量、中剂量P<0.01,低剂量P<0.05),肺泡灌洗液SIgA(高剂量P<0.05),肠道冲洗液 SIgA(高剂量 P<0.05),血清 IgG(P<0.05)。结论川贝枇杷膏在鸡胚、细胞水平能抑制病毒增殖,在流感模型小鼠体内能刺激黏膜局部免疫反应分泌抗体,起到抗病毒的作用,同时能调节抑制促炎因子的上调,起到对炎症因子的调节作用,减轻炎症对肺组织的病理损害,从而对流感起到防治作用。