长野芽孢杆菌普鲁兰酶基因在枯草芽孢杆菌中的重组表达及条件优化

被引量 : 3次 | 上传用户:wenqin2000
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
长野芽孢杆菌(Bacillus naganoensis)来源的普鲁兰酶具有优良酶学性质,并适合淀粉糖化过程中高温、耐酸特点的要求,能够提高淀粉利用率,加速糖化过程,在以淀粉为原料的工业中具有很高的应用价值。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是公认安全(GRAS)菌株,且可将具有活性的天然蛋白直接分泌到培养基中。因此,本研究利用枯草芽孢杆菌成功表达了长野芽孢杆菌来源的普鲁兰酶,并通过启动子和宿主的优化,组成型表达系统的稳定性分析以及诱导型表达系统的构建和优化,不仅在枯草芽孢杆菌中实现并
其他文献
木聚糖酶是糖苷水解酶[EC 3.2.1.x],能将木聚糖水解为低聚木糖以及木糖单糖,在面制品、低聚木糖制备、果蔬生产、饲料和造纸等行业中有良好的应用价值。在本实验室前期研究当中,从链霉菌Streptomyces sp.FA1中分离纯化出一种第十家族(GH10)的木聚糖酶(XynA),并将其在大肠杆菌Escherichia coli BL21(DE3)中胞外表达,但存在大量包涵体。为进一步提高木聚糖
学位
葡聚糖蔗糖酶隶属于GH70酶家族,与GH13和GH77酶同属于水解糖苷酶GH-H家族,不仅能够水解蔗糖通过葡糖基转苷作用合成葡聚糖,当反应体系中存在小分子糖类时,又可通过葡糖基转苷作用生成低聚糖。酶法合成的低聚糖是一种潜在的益生元,不能被人体胃酸和消化道酶降解,只能在大肠处被双歧杆菌等益生菌利用,具有促进肠道双歧杆菌的增殖,减少肠道炎症等功效,在营养健康食品的创新应用研究中受到广泛的关注。本课题利
学位
生物基丁二酸作为一种C4平台化合物,在化工、食品、医药以及农业等领域具有广泛的应用前景。右旋糖酐发酵废液是生物法生产右旋糖酐过程中提取产物之后剩下的发酵液,一般被视为工业废水处理排放。右旋糖酐发酵废液中含有较高浓度的果糖及葡萄糖,将其作为发酵生产丁二酸的原料不仅为废液处理排放提供了新途径,还能带来额外的收益。本文对以右旋糖酐发酵废液为原料发酵生产丁二酸的工艺进行了研究,包括用琥珀酸放线杆菌(Act
学位
裂殖壶菌(Schizochytrium)能利用多种碳源在胞内合成二十二碳六烯酸(DHA)等具有多种生理调节功能的多不饱和脂肪酸(PUFAs)。研究表明其胞内脂质代谢的同时会合成角鲨烯、甾醇和类胡萝卜素等脂肪伴随物,其中类胡萝卜素在提高细胞的抗氧化性和DHA藻油的储藏稳定性方面发挥着重要作用。目前,在裂殖壶菌发酵合成DHA的研究中,主要以DHA产量作为单一指标来评价和优化发酵工艺,而很少关注藻油中类
学位
麦芽糖浆具有甜度柔和、低粘度、低吸湿性及良好的热稳定性等特点,被广泛应用于食品、化妆品和医药等领域。酶法制备麦芽糖浆具有反应条件温和、专一性强、催化效率高等优势,已逐步取代酸法、酸酶法、酶酸法等,成为目前高纯度麦芽糖生产中最主要的方法。麦芽糖淀粉酶(EC 3.2.1.133),又名生麦芽糖淀粉酶或麦芽糖α-淀粉酶,能够水解麦芽三糖、淀粉及相关糊精中的α-1,4糖苷键。它主要应用于淀粉的二次糖化过程
学位
3-羟基丙酸(3-hydroxypropionic acid,3-HP)是一种高价值工业新兴平台化合物,具有广泛的应用前景,但目前尚未实现工业化生产。微生物催化法是一种技术上可行的3-HP生产合成方法,具有底物选择广泛、转化过程简单及转化率高等特点。前期研究已获得了一株可高效催化1,3-丙二醇(1,3-propanediol,1,3-PDO)合成3-HP的Acetobacter sp.,本课题旨在
学位
L-丝氨酸(L-serine)作为一种非必需氨基酸,已广泛应用于医药、化妆品和食品等领域。谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)作为一种食品安全级的菌株,已广泛应用于生产多种氨基酸。本实验室前期从土壤中筛选得到一株产L-丝氨酸的野生型菌株C.glutamicum SYPS-062,随后对其进行诱变育种,得到菌株C.glutamicum SYPS-062-33a。SYP
学位
吡咯喹啉醌(Pyrroloquinoline quinone,PQQ)是维生素C重要前体2-酮基-L-古龙酸(2-keto-L-gulonic acid,2-KLG)生产过程中关键脱氢酶的辅酶。维生素C工业生产中常用菌株为氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans),其含有将底物氧化的重要脱氢酶山梨醇脱氢酶及辅酶PQQ。根据前期研究中发现,维生素C生产的混菌发酵体系中含有的另外两
学位
乳糖酸是一种新型的乳糖衍生物,其在食品,制药和化妆品工业上有很多的应用。现有的合成乳糖酸的方法如化学催化法等具有生产成本高和有副产物产生等缺点,酶法催化合成乳糖酸具有反应条件温和、产物易于分离等特点,但是酶的纯化步骤较为繁琐。而微生物转化法不但具有酶法的优点,而且还可以克服酶法和化学法产乳糖酸的缺点,因而微生物转化合成乳糖酸受到越来越多的研究者的关注。论文从实验室保藏的菌株中筛选产纤维二糖脱氢酶(
学位
氨基葡萄糖(GlcN)和N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)不仅在营养化学品和药品中使用,而且在预防和治疗骨关节疾病、维持软骨组织及关节健康领域也有广泛应用,市场前景广阔。GlcN和GlcNAc的主要生产方法有微生物发酵法、酶转化法以及甲壳素酸水解法。在前期研究中,本研究室以枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)为出发菌株,通过代谢工程改造,构建一株可以发酵生产GlcNAc的工程菌。在上
学位