鹿类动物物种特异性遗传标记的研究

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随着对野生动物保护力度的加强和养鹿业的迅速发展,越来越多的刑事案件和民事案件涉及了鹿类动物种、亚种或品种的鉴别。对于鹿类动物骨骼、皮张、被毛、肌肉、内脏等组织、茸片、血液、胎儿及这些材料制备的各种产品的种属鉴定,传统的方法难以满足识别鉴定的需要,本文针对这一问题,从角蛋白和DNA水平上设计和建立了鹿类动物物种识别方法体系,几乎可以用于任何鹿类初级产品的鉴别。 1.成功地从鹿类动物毛干中提取角蛋白和DNA,在分子水平上建立了对鹿类动物无损伤性的研究方法,至此,本文的方法几乎可以适用于任何鹿类动物的初级产品的鉴定。 2.毛角蛋白SDS-PAGE谱带具有物种特异性,可以作为物种的蛋白指纹。 3.毛角蛋白多态性与取样部位有关,同种不同个体间,如果被毛来自身体的相同部位,角蛋白电泳结果一致,若被毛采自身体的不同部位,蛋白谱带存在差异。因此用角蛋白指纹识别物种时要强调毛样品的来源部位。 4.SDS-PAGE电泳方法分辨率和灵敏度有限,可能有一些角蛋白组份不能被检出,故SDS-PAGE获得的角蛋白指纹不宜用于分析物种之间系统关系,应当用来进行物种识别和鉴定。 5.经过对来自GenBank中的15种鹿类动物的Cyto b基因序列的比较,用通用引物L15774和HSF21作为模板的质量控制,设计了特异性引物DF/DR和CF/CR来鉴定马鹿、梅花鹿、狍;设计了麝类特异性引物MF/MR,用限制性内切酶Rsa Ⅰ酶切扩增产物来区分原麝和林麝。本文建立的5种鹿类动物识别方法体系达到了稳定、高效、灵敏、重复性好的水平。
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