一、研究背景肺癌的发病率及死亡率在当今高居癌症前列。非小细胞肺癌（non-small cell lung cancer,NSCLC）在肺癌病理类型中占主要部分。近年来诊疗技术的提高使越来越多的早期肺癌患者预后改善,但对晚期肺癌患者而言预后仍较差。因此寻找新型药物意义重大。索凡替尼是一种由我国和记黄埔（上海）医药有限公司自主研发的新型小分子抗肿瘤药物。现已有针对索凡替尼的Ⅰ-Ⅲ期临床试验,评估其在多种恶性肿瘤如甲状腺癌、神经内分泌瘤等肿瘤中的有效性和安全性,并取得一定临床疗效。在临床中已发现,对于非小细胞肺癌的患者,使用化疗联合靶向治疗,可增强化疗药物的疗效,同时降低化疗的毒副作用。索凡替尼在其他癌种中的疗效已有报道,但在非小细胞肺癌中的基础研究及临床应用未有报道。且索凡替尼与化疗药物联合在肺癌中的使用尚无研究。因此,本研究通过体内外实验探索索凡替尼在非小细胞肺癌中的作用,并推测索凡替尼与长春瑞滨可能具有联合抗肿瘤效应从而增强化疗疗效,从而为后续临床试验提供数据支持。二、研究方法及内容使用CCK8和克隆形成实验,探索索凡替尼对非小细胞肺癌A549和PC9细胞增殖的影响。细胞划痕实验分析索凡替尼对非小细胞肺癌细胞迁移的影响。通过CCK8、平板克隆和划痕实验,研究索凡替尼联合长春瑞滨对对比单药长春瑞滨对肺癌细胞的影响。利用流式凋亡试剂盒,检测索凡替尼联合长春瑞滨对非小细胞肺癌细胞凋亡的影响。利用裸鼠皮下成瘤模型,验证索凡替尼单药和与长春瑞滨联合时对肿瘤生长的影响。利用免疫组化分析索凡替尼处理后肿瘤中血管内皮特异性标记物CD31的数量。三、研究结果1.索凡替尼浓度依赖性地抑制A549和PC9细胞增殖。随着索凡替尼浓度增加,非小细胞肺癌细胞活力下降。与长春瑞滨联合使用时可增强长春瑞滨对肺腺癌细胞增殖的抑制。2.索凡替尼减少A549和PC9细胞迁移。不同浓度索凡替尼均可降低肺癌细胞的迁移能力。使用长春瑞滨联合索凡替尼对比长春瑞滨单药,双药组可提高对肺腺癌细胞迁移的抑制。3.索凡替尼增强长春瑞滨对A549和PC9细胞的凋亡作用。相对于长春瑞滨单药组,索凡替尼联合长春瑞滨更能有效增加细胞的凋亡。4.裸鼠皮下成瘤模型验证索凡替尼对肿瘤的抑制作用。测量对照组、索凡替尼单药组、长春瑞滨单药组及两药联合组肿瘤体积,发现索凡替尼能抑制肿瘤生长,与长春瑞滨协同可增强抗肿瘤作用。5.索凡替尼在肺腺癌的裸鼠模型中的免疫组化提示CD31的表达数目在索凡替尼单药组和索凡替尼联合长春瑞滨的双药组出现下降。四、结论通过体内和体外实验进行了索凡替尼在非小细胞肺癌中的抗肿瘤研究,证明索凡替尼能够抑制A549和PC9细胞的增殖、迁移,当联合长春瑞滨时可增强长春瑞滨对A549和PC9细胞增殖、迁移和凋亡的影响。索凡替尼在体内的抗肿瘤效应部分是通过抑制肿瘤血管生成实现的。