论文部分内容阅读
背景与目的:膀胱癌是泌尿系统一种复杂且最常见的恶性肿瘤,近年来膀胱癌的诊治已经取得了巨大的进展,但其死亡率仍非常高。膀胱癌的治疗方法包括手术、放疗、化疗和生物治疗,但其术后转移和复发几率很高。因此预测和干预手段,对膀胱癌的防治十分重要。尽管近年膀胱癌预测及研究模型已经取得巨大进展,但为了进一步提高检测工具的特异性及可信性,更多全新的生物标记急需被补充。增强子是促进靶基因表达的顺式作用元件。已有研究表明,增强子对雌激素产生应答,诱导雌激素受体的转录,这些雌激素相关的受体与乳腺癌雌激素的分子机制密切相关。进一步研究eRNAs可能有助于更好地了解恶性肿瘤的进展及转录调控的意义。SMAD7增强子RNA(SMAD7e)是一种雌激素敏感的eRNA。然而,SMAD7e与膀胱癌之间的关系仍不清楚。膀胱癌中存在性别差异,说明雌激素在膀胱癌中发挥重要作用,SMAD7e增强子RNA(SMAD7e enhancer RNA,SMAD7e)是一种雌激素反应性eRNA,本研究主要探讨SMAD7e与雌激素的关系及其在膀胱癌中的作用方法:采用实时qPCR技术检测38例膀胱癌及癌旁组织中SMAD7e的相对表达水平。利用实时qPCR方法检测雌激素刺激5637细胞和T24细胞1小时后SMAD7e的表达水平。我们检测了利用CRISPR-CAS13A技术敲底SMAD7e基因后对膀胱癌细胞生物学行为的影响。我们同时使用CCK-8技术和Edu技术检测5637细胞和T24细胞的增殖试验。用划痕试验检测5637细胞和T24细胞迁移能力的变化。用Caspase-3 ELISA技术检测5637细胞和T24细胞的凋亡。利用Transwell实验检测癌细胞侵袭能力的变化。结果:SMAD7e在膀胱癌组织中过表达,并且与临床病理特征呈正相关。雌激素可以通过诱导SMAD7e的产生,来促进癌细胞的增殖、迁移、侵袭,并抑制癌细胞的凋亡。用CRISPR-CAS13A技术敲底SMAD7e可以抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭,促进膀胱癌细胞的凋亡,并且可以影响雌激素的的致癌作用。结论:本研究证明了SMAD7e可以促进膀胱癌的发生发展,为膀胱癌的诊治提供了潜在的靶点。而雌激素通过影响SMAD7e的产生,也可以对膀胱癌产生促进作用。本文以全新的角度阐述了雌激素在膀胱癌中的作用机制,诠释了引起膀胱癌中的性别差异的分子通路,为膀胱癌的早期预防和治疗提供了新的靶点。