本研究首先是以青啤酵母和耐酒精酵母为亲本菌株进行了分子鉴定和耐酒精杜氏管试验，结果表明青啤酵母对酒精的最高耐受力为10%，耐酒精酵母对酒精的最高耐受力可达14%。　　其次以两亲本啤酒酵母的单倍体细胞作为融合亲本，进行了单倍体的制备研究，优化了产孢培养基、培养时间、培养温度及酶浓度等产孢条件。在25℃的条件下培养七天，产孢率分别可以达到90.00%和89.67%，确定了培养温度及培养时间。用浓度为0.2 g/L的溶壁酶30℃水浴处理，子囊孢子释放率分别为77.81%和87.00%。　　然后对青啤酵母和耐酒精酵母的单倍体原生质体的形成和再生条件进行了研究，最终优化的青啤酵母的单倍体原生质体制备和再生的条件是：菌龄16 h，以1.5 mL2%蜗牛酶32℃下处理90 min。在上述条件下，青啤酵母单倍体原生质体的制备率和再生率为95.22%和13.58%。耐酒精酵母的单倍体原生质体形成和再生的条件是：菌龄16 h，以1.5 mL2%蜗牛酶32℃下处理90 min。在上述条件下，耐酒精酵母单倍体原生质体的制备率和再生率为92.40%和16.34%。　　接下来对青啤酵母和耐酒精酵母的单倍体原生质体进行紫外灭活和高温灭活的研究，确定了灭活条件为：青啤酵母的单倍体原生质体在紫外灯下照射14 min，耐酒精酵母的单倍体原生质体经60℃高温灭活30 min的双亲灭活条件，融合后进行筛选。　　最后获得了三株耐酒精能力高于青啤酵母的重组菌株，进行发酵性能的测定，与亲本菌株进行比较，其亲本青啤酵母的CO2失重、SO2含量、α-N含量、GSH含量等比较相近，保留了亲本的优良条件，发酵性能良好。