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Mindin（也称为spondin2）作为F/M-spondin家族的一员是一种结构高度保守的细胞外基质蛋白，含有FS1、FS2和WSXW模序的TSR结构域，在先天性免疫系统中具有重要的作用[1]。近期研究发现，作为模式识别分子mindin能直接与细菌的表面抗原比如脂多糖(LPS)，磷脂(LTA)等结合[2]。Mindin基因缺陷型小鼠能抵抗脂多糖引起的感染性休克，并且清除细菌感染能力受损[3]。巨噬细胞以及肥大细胞表现出对广谱细菌刺激缺陷的反应，他们分泌的炎症细胞因子TNF-a和IL-6有明显的缺失[4]。故本课题主要探讨mindin对巨噬细胞的招募和吞噬作用的机制及下游的信号通路。 本课题研究首先构建了一种趋化反应体外模型，即利用琼脂糖包被mindin重组蛋白诱导巨噬细胞趋化，成功模拟并检测mindin具有招募巨噬细胞、中性粒细胞的功能。其次，本课题应用吞噬实验，利用荧光显微镜和流式细胞术检测巨噬细胞对荧光乳胶微粒的吞噬个数，发现mindin能促进巨噬细胞的吞噬作用。此上研究方法模拟了炎症环境，降低其他炎症因子的干扰，对单一因子对炎症的反应的研究具有参考意义。再次，本课题还利用CIPHER的技术筛选出整合素CD11b和CD18等5种配体与mindin具有相关性，通过免疫共沉淀明确mindin能与CD11b与CD18相互结合。为了进一步明确其结合结构域，我们通过分子克隆方法，构建了mindin与CD11b/CD18不同片段的质粒进行免疫共沉淀，发现mindin的FS片段与整合素CD11b/CD18的αα11区域结合，并用放射线同位素标记mindin测出这两者的亲和力。为了验证mindin是否通过整合素CD11b/CD18的途径诱导巨噬细胞的趋化和吞噬作用，我们利用CD11b/CD18的中和抗体M1/70，M18/2阻断与mindin结合，在趋化和吞噬模型中mindin的作用明显下降。可见mindin是通过与整合素CD11b/CD18的相互作用诱导巨噬细胞的趋化和吞噬功能。用western blot和核浆分离等技术进一步发现mindin能促进整合素CD11b/CD18下游的syk的磷酸化，并且沿着MERK1/2-ERK1/2这条通路，而非AKT通路。 本课题以构建体外的炎症模型的实验方法研究mindin在炎症反应中的功能并探讨了mindin在炎症中主要与整合素CD11b/CD18的相互作用促进巨噬细胞的趋化和吞噬。并且明确了其下游的信号通路包括促进整合素CD11b/CD18下游Syk的磷酸化和MEK、ERK的磷酸化，诱导NF酸化，诱导D的入核，激活NF核，途径。进一步明确了mindin是整合素CD11b/CD18众多配体中的一员，有助于探讨mindin在炎症性反应之外的生物学功能及作用机制。