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目的:组织纤溶酶原激活酶(tissue plasminogen activator,t PA)是目前唯一经过美国食品和药物管理局(FDA)批准用于急性脑卒中的溶栓药物,然而由于t PA的时间窗狭窄以及增加了脑出血的风险等原因,应用患者比例非常小。硫化氢(hydrogen sulfide,H2S)是继一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)后人们发现的第三个重要的内源性气体信号分子。本课题研究目的是探究硫化氢是否具有减轻脑缺血后t PA导致的脑出血的作用。方法:利用雄性C57/BL6J小鼠,通过大脑中动脉堵塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO),建立脑缺血模型。术前15分钟腹腔注射葡萄糖(6 ml/kg,50%w/v)。缺血2小时,再灌注后,立即股静脉注射t PA或生理盐水(4 ml/kg),腹腔注射硫化氢供体或溶剂。小鼠随机分为Sham组(假手术组),Control组(MCAO+saline+vehicle),t PA组(MCAO+t PA+vehicle),t PA+Na HS组(MCAO+t PA+Na HS),t PA+ADT组(MCAO+t PA+ADT),t PA+ADT-OH组(MCAO+t PA+ADT-OH)。利用血红蛋白检测试剂盒,检测MCAO后24小时脑中血红蛋白含量变化;利用TTC(2,3,4-氯化三苯基四氮唑)染色的方法,检测小鼠MCAO后1天及7天的脑梗死体积;利用检测伊文思蓝(evans blue,EB)渗透的方法,检测血脑屏障破坏程度;利用称重法检测小鼠MCAO后24小时脑水肿程度;利用神经功能评分、转角实验以及转棒实验检测MCAO后连续7天的小鼠神经功能恢复情况;利用明胶酶谱的方法,检测MMP-9活性变化;利用亚甲基蓝方法,检测小鼠血液H2S水平。结果:与Sham组及Control组相比,t PA组小鼠缺血侧脑半球组织中血红蛋白(hemoglobin)含量明显上升,证明脑缺血后t PA导致脑出血。H2S供体Na HS,ADT及ADT-OH减轻了t PA引起的脑出血。ADT-OH减轻了缺血后t PA加剧的缺血侧脑组织中伊文思蓝(evans blue,EB)渗透及水肿的加重,证明H2S供体抑制了脑缺血后t PA对血脑屏障的破坏。根据MCAO后连续7天的神经功能损伤评分(m NSS),转角测试和转棒实验的行为学测试,结果显示,ADT-OH减轻了MCAO及t PA处理导致的小鼠神经功能损伤。ADT-OH对MCAO及t PA处理后1天的梗死体积影响不大,但是减轻了MCAO及t PA处理后第7天t PA导致的梗死体积增加。明胶酶谱显示,脑缺血导致MMP-9活性上升;t PA提高了缺血侧脑中MMP-9活性;ADT-OH降低了缺血侧t PA引起的MMP-9活性的上升。创新:首次发现H2S供体,能够减轻脑缺血后t PA导致的脑出血。结论:H2S供体能明显减轻脑缺血后t PA导致的脑出血,促进神经功能恢复。H2S供体可能成为今后脑卒中后t PA导致的脑出血的新的药物治疗手段。