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目的:研究β-细辛醚对氧糖剥夺/复糖复氧诱导SH-SY5Y细胞损伤的作用和机制。方法:1.细胞模型制备:Na2S2O4溶于无糖Earle’s液配制成浓度为15mmol/L的溶液,给予SH-SY5Y细胞,氧糖剥夺90 min,再加入完全培养基继续培养24 h实现复糖复氧,建立氧糖剥夺/复糖复氧(OGD/R)损伤细胞模型。采用CCK-8法及LDH释放率测定法筛选最佳给药浓度;2.给药处理:取对数生长期的SH-SY5Y细胞,以密度为5×104个/mL接种于96孔板,将细胞分为7组,每组5个复孔,分别为空白对照组、OGD/R模型组、OGD/R+β-细辛醚浓度分别为10μg·mL-1、20μg·mL-1、40μg·mL-1、80μg·mL-1,OGD/R+15μg·mL-1依达拉奉阳性药组,分组给药后置于培养箱中培养24 h后进行检测;3.酶联免疫法检测最佳给药浓度β-细辛醚对OGD/R诱导SH-SY5Y细胞损伤后炎症因子(TNF-α)的影响;4.免疫蛋白印迹法检测最佳给药浓度β-细辛醚对OGD/R诱导SH-SY5Y细胞损伤后TNF-R1、Glu R2蛋白表达的影响;5.钙离子成像检测最佳给药浓度β-细辛醚对OGD/R诱导SH-SY5Y细胞钙浓度的影响;6.ELISA法检测最佳给药浓度β-细辛醚对OGD/R诱导SH-SY5Y细胞损伤后细胞内超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力和丙二醛(MDA)含量的影响;荧光探针法(DCFH-DA)检测活性氧(ROS)含量。结果:1.CCK-8法检测结果表明:与对照组相比,OGD/R组SH-SY5Y细胞存活率降低为(64.83±2.2)%(P<0.001),而给予β-细辛醚(10、20、40、80μg·mL-1)和依达拉奉(15μg·mL-1)可使细胞存活率分别提高到(72.65±8.85、83.39±11.10、83.63±5.83、80.87±2.92)%和(80.28±4.76)%(P<0.001或P<0.01),说明β-细辛醚(10、20、40、80μg·mL-1)均能够提高OGD/R损伤后SH-SY5Y细胞的存活率,其中β-细辛醚(20、40、80μg·mL-1)均显示出统计学差异。2.细胞LDH释放检测结果表明:与对照组相比,OGD/R组释放率增加为(1895±115.2)%(P<0.001),而给予β-细辛醚(10、20、40、80μg·mL-1)和依达拉奉(15μg·mL-1)可使LDH释放率分别减低为(1171±131.21、1221±248.3、1142±124.8、1146±71.44)%和(1007±142.6)%(P<0.01或P<0.001),说明β-细辛醚(10、20、40、80μg·mL-1)均可以减少OGD/R诱导SH-SY5Y细胞LDH释放率,其中β-细辛醚(20、40、80μg·mL-1)均显示具有统计学差异。3.ELISA检测炎症因子结果表明:与对照组相比,OGD/R组引起炎症因子TNF-α浓度上升(P<0.001);与OGD/R组相比,β-细辛醚(20μg·mL-1)及依达拉奉(15μg·mL-1)的炎症浓度有下降的趋势,具有一定的改善作用,结果具有统计学意义(P<0.05或P<0.001)。4.免疫蛋白印迹检测结果表明:与对照组相比,OGD/R诱导SH-SY5Y细胞后发现TNF-R1蛋白表达明显升高(P<0.001),而β-细辛醚(20μg·mL-1)及依达拉奉(15μg·mL-1)处理细胞后TNF-R1蛋白表达显著表现出下降趋势(P<0.05或P<0.001);与对照组相比较,OGD/R组诱导SH-SY5Y细胞时发现Glu R2蛋白表达显著降少,而经β-细辛醚(20μg·mL-1)及依达拉奉(15μg·mL-1)处理后Glu R2蛋白表达显然增加,并有统计学意义。5.钙离子成像检测结果表明:与对照组相比,OGD/R诱导SH-SY5Y细胞后,发现钙离子荧光强度明显增强,而给予β-细辛醚(20μg·mL-1)及依达拉奉(15μg·mL-1)干预后钙离子荧光强度显著下调。6.ELISA检测细胞氧化应激结果表明:与对照组相比,OGD/R诱导SH-SY5Y细胞后发现SOD、CAT和GSH-PX的活力明显减少(P<0.001或P<0.01),其MDA和ROS含量增多,而给予β-细辛醚(20μg·mL-1)及依达拉奉(15μg·mL-1)干预可以使细胞内SOD、CAT和GSH-PX的活力增加(P<0.05或P<0.01)、其MDA和ROS含量减少(P<0.05)。结论1.β-细辛醚各剂量(10μg·mL-1、20μg·mL-1、40μg·mL-1、80μg·mL-1)对OGD/R诱导的SH-SY5Y细胞损伤均具有改善作用;2.β-细辛醚(20μg·mL-1)对OGD/R诱导SH-SY5Y细胞损伤后的氧化应激、炎症反应有显著性改善作用;3.β-细辛醚(20μg·mL-1)可使OGD/R诱导SH-SY5Y细胞损伤后的TNF-R1蛋白表达明显增加、Glu R2蛋白表达显著降低;4.β-细辛醚(20μg·mL-1)可降低OGD/R诱导SH-SY5Y细胞损伤后的钙浓度过度升高。