VFB是由西北农林科技大学无公害农药研究服务中心从马齿苋(Portulaca oleracea L.)和甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch.)等几种植物材料中提取加工成的一种植物源抗病毒剂。前期研究表明,VFB对烟草、辣椒等多种作物上的病毒病具有较好的保护和治疗作用,能够钝化病毒粒子,抑制TMV对烟草的初侵染及其在烟草体内的复制增殖;能够使普通烟的叶绿素、游离氨基酸、总酚、类黄酮含量明显升高,降低丙二醛(MDA)的含量,提高普通烟中多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性。本研究以心叶烟(Nicotiana glutinosa L.)和普通烟(Nicotiana Tabacum L.)为寄主材料,以烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus, TMV)为供试毒源,通过对VFB配方优化、活性成分分离及其对寄主植物生理生化变化影响的研究,主要得出以下结果:VFB各组分对TMV均有一定的钝化作用,对TMV的初侵染和复制增殖抑制效果较差;将四种植物材料配制成VFB提取液后,其钝化活性达到51.52%,与对照药剂病毒A相近;当加入四种助剂后,其钝化活性得到进一步提高,达60.52%,比对照药剂病毒A提高11.84%。通过正交试验对VFB制剂中四种助剂的配比进行优化,得到一个初步优化配方。结果表明,助剂C对VFB活性影响最大,其次为助剂D、A和B;当四种助剂的含量为:A 0.1mg/mL,B 0.2mg/mL,C 2.0μL/mL,D 0.8mg/mL,其钝化活性达73.60%,比原配方提高13.08%,比对照药剂病毒A提高21.92%。通过大孔吸附树脂和硅胶柱层析并结合活性追踪,对VFB中的活性成分进行了分离。结果表明,VFB中的活性成分主要集中在50%乙醇洗脱部位,经多次柱层析分离后,得到化合物B1 - 0、B1 - 1、B1 - 5和B1 - 6四个化合物。其中,两个鉴定为(E)-2-(4-methoxyphenyl)ethenol和2,3-dihydro-7-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)chromen-4- one,两个正在鉴定之中。生测结果表明,四个化合物对TMV均有较好的活性,在1mg/mL浓度下,其对TMV的钝化活性分别达到54.66%、60.89%、50.38%和48.38%。测定了VFB对普通烟叶片细胞膜通透性的影响。结果表明,VFB预防处理能够明显地抑制病毒侵染后导致的细胞膜通透性的增大,在整个试验期间,其电导率变化比较平缓,与空白对照接近,低于同期其它药剂处理的电导率,与发病对照相比差异明显;VFB治疗处理对比预防处理效果差,但其效果高于药剂对照病毒A的处理。测定了VFB对普通烟叶片中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶活性,结果发现VFB能够诱导普通烟叶片中的SOD、CAT、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶等细胞防御酶活性增强,提高植物抗病性。综上所述可知,VFB配方经优化后,其活性得到显著提高;VFB经大孔吸附树脂和多次硅胶柱层析分离后,得到化合物B1-0、B1-1、B1-5和B1-6四个化合物,其对TMV均有较好的活性;VFB处理普通烟后,可明显抑制病毒侵染后导致的细胞膜通透性增大,提高SOD、CAT、β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶等细胞防御酶活性,增强寄主植物的抗病性。