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低剪切应力诱导血管内皮细胞(Vascular endothelial cells,VECs)炎症是动脉粥样硬化(Atherosclerosis,As)的重要环节,但其具体调控机制尚不明确。新近研究提示,焦亡(炎性程序性细胞死亡)是剪切应力敏感的生物学过程并贯穿As病变进程。前期研究表明DNA羟甲基化酶TET2为剪切应力敏感基因,低剪切应力负性调控TET2的表达,但低剪切应力与As间的关系以及TET2在低剪切应力诱导As中的作用及其调控机制尚不清楚。目的:探讨TET2在低剪切应力诱导HUVECs焦亡中的作用及其机制。方法:1、采用平行平板流动腔系统,细胞水平观察低剪切应力和生理剪切应力下人脐静脉血管内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)焦亡相关蛋白Caspase1、GSDMD、NLRP3、IL-1β以及TET2的表达水平;2、采用慢病毒转染技术,构建低表达TET2 HUVECs细胞株,免疫荧光和Western blotting检测其转染效率;3、免疫荧光检测TET2 shRNA对细胞焦亡相关蛋白Caspase1的表达水平;Western blot检测TET2 shRNA对HUVECs焦亡相关蛋白Caspase1、GSDMD、NLRP3、AIM、IL-1β的表达水平;透射电镜观察TET2 shRNA对HUVECs焦亡的影响;4、透射电镜、流式细胞术、ATP含量测定试剂盒、ROS荧光探针检测TET2 shRNA对HUVECs线粒体形态和功能的影响。结果:Western blot结果表明,与生理剪切应力相比,低剪切应力组HUVECs焦亡相关蛋白Caspase1、GSDMD、NLRP3、IL-1β表达明显上调;Western blot结果表明,与生理剪切应力相比,低剪切应力明显下调TET2的表达水平;免疫荧光结果表明TET2慢病毒转染效率高达90%,Western blotting结果表明TET2shRNA明显下调TET2表达;免疫荧光显示TET2 shRNA组Caspase1表达明显高于对照组;Western blot结果表明TET2 shRNA明显上调HUVECs焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase1、GSDMD、IL-1β表达,但对AIM的表达无明显影响;透射电镜结果表明TET2 shRNA处理组细胞膜破裂,胞内容物外泄;透射电镜结果表明TET2 shRNA组线粒体体积增大,线粒体嵴移向周围、缩短、数量变少,并出现局灶性空泡,表明TET2 shRNA组诱导HUVECs线粒体损伤;流式细胞术结果显示TET2 shRNA组HUVECs线粒体膜电位异常,主要表现为:大部分细胞分布在Q3区,同时Q2/Q3的比例减少;ATP含量测定结果表明TET2 shRNA组HUVECs线粒体ATP生成明显低于对照组;ROS生成水平测定结果表明TET2 shRNA组明显高于对照组。结论:低剪切应力下调TET2,导致线粒体功能障碍,促使HUVECs焦亡。