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蝗绿僵菌（Metarhizium acridum）是一类应用广泛的虫生真菌,在农业害虫生物防治中起着重要作用。虫生真菌的致病力是影响其广泛使用的主要限制因素,迄今为止,实验室在前期工作中构建了蝗绿僵菌CQMa102在侵染过程中,相比于体内,在体表时期的高表达的差减文库,从此文库中,选择了蝗绿僵菌CQMa102体表时期高表达的一条EST序列,该EST序列长750bp,经过比对发现该序列与其他物种中的氰化物水合酶的同源性较高。利用本实验室构建的蝗绿僵菌CQMa102在产孢时期的均一化全长cDNA文库,获取了该基因（MaChy）的cDNA全长。通过以基因组为模板PCR扩增后克隆测序的方式,成功获取了MaChy基因的DNA全长。利用RNAi的方法研究了MaChy的功能。主要研究结果如下:①获得了MaChy基因的cDNA全长,并进行了相关生物信息学分析。MaChy基因cDNA序列全长为1202bp,5’端有80bp的UTR区域,3’端有50bpUTR区域,其开放阅读框为1074bp。预测该基因编码357个氨基酸,与多个物种如eptosphaeria maculans（AAF66098.1）、Aspergillusniger（XP001389844.1）、Fusarium solani （CAM82815.1）、Neurospora crassa（XP960160.2）、Penicillium chrysogenum Wisconsin（XP002562104.1）、Aspergillus niger（ABX75546.1）、Alternaria brassicicola（AAP88966.1）对应所编码都有97%以上的蛋白同源性。该蛋白没有信号肽,也不具有跨膜的结构。②生物信息学分析结果显示,该蛋白的分子量39.78 kDa,等电点为5.53。为酸性蛋白。预测其在177位（NASK）、206位（NASE）、332位（NSTD）氨基酸处存在N-糖基化位点;4位（TIR）、77位（SMR）、300位（TKK）、323位（TPK）氨基酸处存在蛋白激酶C磷酸化位点; 104位（SELD）、134位（THVE）、179位（SKHE）、341（STLE）处有一个酪蛋白激酶2磷酸化位点;122位（GTVINH）、144位（GSGDSL）、238位（GARLGL）、262位（GNGYSR）N-十四酰化位点。③通过PCR扩增基因组送测序后,获取了MaChy基因的DNA全长,将DNA序列与cDNA序列用DNAMAN软件比对,结果显示:MaChy基因不含内含子, DNA全长1202bp。④采用RNAi的方法进行MaChy基因的功能研究。构建MaChy基因的农杆菌介导法转化的RNA干扰载体后,通过农杆菌介导的方法转化蝗绿僵菌CQMa102中,经过培养基的初筛和PCR筛选后,获得多个稳定的MaChy基因干扰突变株。⑤分析了MaChy基因干扰突变株的毒力变化,统计分析发现干扰突变株和出发菌株的半数致死时间没有显著差异,推测MaChy基因的功能与毒力不相关。⑥观察干扰突变株与出发菌株在附着胞形成方面的差异,从多个角度进行统计分析,在附着胞形成比率,形成时间,附着胞形态,附着胞大小都没有显著的差异。⑦分析了MaChy基因在体表和体内的表达差异。统计定量PCR数据得到的结论显示,在体表阶段的表达量最高,大约是体内表达量的2.5倍,而在1/4SDA液体培养基中的表达量与体内表达量基本相同,表明该基因在体表阶段是高表达的。