利用同源序列提高外源基因的表达及兔防御素基因转化番茄的研究

来源 :中国科学院遗传学研究所 中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dengliang109
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第一部分:利用同源序列提高外源基因在植物组织中的表达,研究人员的研究内容包括:1、从拟南芥中克隆了18SrRNA基因,从烟草中克隆了核骨架结合序列(Scaffole attachment region sequences,简称SARs)作为同源多拷贝序列,构建基因打靶载体.2、采用农杆菌介导法和基因枪法转化拟南芥.并对转化的植株和材料进行GUS基因瞬间表达以及稳定表达的检测.3、组织化学染色及荧光光度分析表明18SrRNA基因以及SARs均提高了GUS基因的表达水平.4、对转基因植株进行了Southern点杂交检测,证明了GUS基因已整合到了拟南芥的基因组中.Southern杂交检测表明GUS基因定点整合到了拟南芥的rDNA区.第二部分:转兔防御基因番茄的获得及其抗病性检测,研究内容如下:1、构建含18SrRNA基因的植物表达载体.以pBin35Srnp1和pBin35SNP1两种质粒作NP-1的植物表达载体.2、用基因枪法和农杆菌介导法转化番茄,得到转基因植株.3、对转基因植株进行了PCR、Southern杂交、Northern点杂交检测,证实NP-1基因转入番茄,并得到转录.4、对转基因番茄植株进行抗病、抑菌检测,发现转基因番茄能够抵抗番茄青枯病的侵袭.
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