番鸭呼肠孤病毒病是1997年以来我国新出现的高发病高死亡的番鸭疫病,危害极大。为探讨番鸭呼肠孤病毒(MDRV)和H9亚型水禽流感病毒(H9AIV)单一感染和协同感染对番鸭细胞免疫功能的影响,本试验以MDRV和H9AIV为材料,人工感染8日龄健康雏番鸭,于感染后不同时间取样进行如下研究：(1)应用MTT法测定感染后1d、3d、5d、7d、10d和14d番鸭血液、胸腺和脾脏中T淋巴细胞刺激指数,分析MDRV和H9AIV感染对番鸭T淋巴细胞增殖功能的影响。结果显示8日龄番鸭人工感染后,单一感染组和共感染组番鸭血液、胸腺和脾脏的T淋巴细胞刺激指数均明显低于健康对照组,其中共感染组又低于单一感染组。表明H9AIV和MDRV能抑制番鸭外周血液及免疫器官(胸腺、脾脏)中T淋巴细胞增殖功能,MDRV与H9AIV协同感染进一步加重细胞免疫抑制程度。(2)应用流式细胞仪测定感染后1d、4d、7d、11d、14d、21d和30d番鸭血液T淋巴细胞比率,分析MDRV和H9AIV感染对番鸭血液T淋巴细胞数量的影响。结果显示：单一感染组和共感染组番鸭血液T淋巴细胞比率均低于健康对照组(差异显著),PI21d时各感染组T细胞比率逐渐上升,PI30d时单一感染组与对照组差异不显著,而共感染与对照组差异显著。表明MDRV与H9AIV均能导致番鸭血液中T淋巴细胞数量降低,协同感染更为明显。(3)观察试验番鸭发病死亡和免疫器官发育情况,测定感染后7d和14d试验鸭的免疫器官指数。结果显示：共感染组的发病率和死亡率均明显高于单一感染组；MDRV组和共感染组番鸭的胸腺和法氏囊萎缩,胸腺和法氏囊器官指数均降低,但脾脏肿大坏死,脾脏指数较对照组和AIV组升高。表明H9AIV感染不影响番鸭的生长发育和免疫器官指数,MDRV单一感染或与H9AIV协同感染增加番鸭发病率和死亡率,并加重病情。(4)应用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞,按常规白细胞计数法测定感染后7d和14d番鸭血液、脾脏和胸腺中淋巴单核类细胞数量,结果显示：MDRV组与共感染组番鸭血液、脾脏和胸腺中的淋巴单核类细胞数量均低于对照组和AIV组,差异极显著；而AIV组与对照组差异不显著。表明H9AIV对番鸭血液、脾脏和胸腺中的淋巴单核类细胞数量影响较小；MDRV能导致番鸭淋巴单核类细胞数量明显降低；两者共感染能使感染鸭淋巴单核类细胞数量进一步下降。(5)应用MTT法测定感染后1d、7d、14d、21d和28d番鸭血液中细胞毒性T细胞对靶细胞(SP2/0骨髓瘤细胞)的杀伤比率,分析MDRV和H9AIV感染对番鸭CTL细胞杀伤功能的影响。结果显示：8日龄番鸭人工感染后,AIV组CTL细胞杀伤活性与对照组差异不显著,MDRV组CTL细胞杀伤活性于PI14d与对照组相比差异显著,其余差异均不显著；共感染组在PI7d-28d感染鸭血液CTL细胞杀伤活性均低于对照组,差异显著。表明H9AIV感染基本不影响番鸭血液CTL细胞的杀伤活性,MDRV感染对CTL细胞杀伤活性有一定的抑制作用,MDRV和H9AIV协同感染对CTL细胞杀伤活性有明显的抑制作用。综上所述,8日龄雏番鸭感染H9AIV后其生长发育、免疫器官指数、淋巴单核类细胞数量和CTL细胞杀伤活性基本不受影响,但H9AIV感染能不同程度降低血液T细胞数量和增殖能力。MDRV感染不仅导致番鸭发病死亡,且免疫器官严重受损,番鸭血液和免疫器官中淋巴单核类细胞数量、CTL细胞杀伤活性、T细胞比率和T细胞增殖功能显著下降。MDRV和H9AIV协同感染具有不同程度的叠加效应。上述研究结果表明,番鸭呼肠孤病毒和H9流感病毒均可导致番鸭细胞免疫抑制,番鸭呼肠孤病毒对番鸭细胞免疫抑制比H9流感病毒显著,两者同时感染则进一步加重番鸭细胞免疫抑制程度。