人参液泡膜水孔蛋白PgTIP1在植物生长发育过程中的功能研究

来源 :中国科学院大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sntengwei
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
水孔蛋白属于主要膜内在蛋白家族,是一种介导水分跨膜运输的功能性通道蛋白。植物细胞的生长、发育与细胞内的水分状态密切相关,在植物生长发育过程中不同水孔蛋白在时空上的特异表达表明它们参与了植物生理活动的方方面面。液泡膜水孔蛋白是水孔蛋白分类中很重要的一类蛋白,它是定位于液泡膜上的水孔蛋白,介导了水分在液泡膜上的跨膜运输,在调节生物体内水分平衡的过程中起着十分重要的作用。  我们实验室先前通过抑制差减杂交和cDNA文库的筛选在激素驯化人参细胞系中克隆到了PgTIP1基因,而且该基因在激素驯化的人参细胞系中特异表达。初步的生理功能研究表明过PgTIP1能够促进拟南芥的生长,而且过表达PgTIP1的拟南芥也表现出抗旱、抗盐和对冷有一定适应能力的抵抗外界环境胁迫的表型。但是关于PgTIP1的具体生理功能及其活性调控还没有被研究过。  在本篇论文中,我们对PgTIP1的生理功能进行了系统的分析和研究。研究结果表明,PgTIP1在人参的根、茎和叶中均大量表达。为了研究该基因的生理功能,我们以人参为背景,构建并筛选了PgTIP1基因的RNAi及过表达转基因株系,初步的研究结果表明,过表达PgTIP1可促进人参的生长,主要表现在根的生长明显发达和叶片明显增大,而抑制该基因的表达则有相反的结果。进一步将PgTIP1过表达于油菜和拟南芥中,结果发现过表达株系同样表现出了生长加快的优势,主要表现在根的长度增加,叶细胞变大,开花时间提前,具有更多的果荚而且种子也变大。深入地对过表达株系的研究发现,一方面,过表达PgTIP1促进了植物对水分和离子的吸收,同时促进了植物的光合作用;另一方面,PgTIP1调控了细胞周期相关基因的表达,从而加快了细胞的生长。  为了更进一步的研究PgTIP1的活性调控,我们通过定点突变将预测到的PgTIP1的2个磷酸化位点(Thr54和Ser128)进行突变,分别突变成丙氨酸和天冬氨酸,然后将突变的PgTIP1表达于酵母和拟南芥中进行研究,结果表明Ser128是PgTIP1蛋白活性所必须的。进一步我们通过pull-down筛选到了与PgTIP1互作的一个蛋白激酶AtIBS1,pull-down、酵母双杂交和BiFC实验均证明了两者能够相互作用,体外磷酸化实验也表明PgTIP1能够被AtIBS1所磷酸化而且Ser128是PgTIP1被AtIBS1磷酸化所必须的。我们的研究还发现,过表达PgTIP1能够提高拟南芥对盐的耐受力。盐胁迫下,过表达PgTIP1的拟南芥能够生长的更好,表现在根的生长速度加快和叶片明显增大;同时过表达PgTIP1的拟南芥中盐胁迫相关基因的表达均被上调了。  综合以上所述,我们的研究结果揭示PgTIP1不仅能够促进植物的生长与发育,同时还能够提高拟南芥对盐的耐受力;此外,其蛋白活性还受到AtIBS1的磷酸化调控且Ser128是其蛋白活性所必须的;该基因具有重要的潜在应用价值。
其他文献
本研究主要发现细胞外基质蛋白1(ECM1)在实验性自身免疫性脑脊髓炎模型(EAE)中具有显著的预防及治疗性效果,并且其效果主要是通过在发病前期抑制致病性的Th17细胞的产生来实现
半导体制造过程具有工艺流程复杂、工序多、不确定性强等显著区别于其它制造行业的特点,随着半导体产业朝着多品种、小批量的方向发展,有效的半导体制造系统生产调度能快速响
中华传统文化在小学教育中的渗透,对于提升学生文化素养、推动中华传统文化传承具有重要意义本文以提升中华传统文化与小学教育的融合深度、充分发挥中华传统文化育人价值为
随着科学技术的不断发展,信息化趋势成为当下最为明显的特征.在移动互联网和大数据背景下,各大高校也陆续开始建设智慧教学.本文对智慧教学进行论述,以期能够为学生提供更好
当前,相关于智库的探索与研究愈发成熟,形成较为丰富多样的智库建设发展理论与成就.要加快对体育训练智库建设的步伐,就要精准把握新时代体育研究工作的特点,理清整合体育训
随着新课程改革的不断推进,小学科学教学有了全新的要求和目标,传统的教学方式以及教学思路,已经不能与高速发展时代相适应,因此教师应积极转变陈旧的教学模式,将生活化教学
该论文以牛奶为原料分离出42株球菌,经鉴定其中15株为乳链球菌(Streptococcus lactis).对15株乳链球菌进行Nisin效价测定后,确定SN-21为诱变的出发菌珠(598.1IU/ml,NO.95培养
淋巴细胞的组织特异性归巢是机体免疫与宿主防御的关键环节,其组织特异性是由表达在淋巴细胞表面的整合素与表达在不同组织中的配体蛋白相互作用而决定的。整合素α4β7通过与
试样经H2SO4-K2SO4分解,在HCl溶液中,以甲基橙作指示剂,用硫酸铈标准溶液滴定Sb,在滴定完Sb的溶液中,以甲基橙作指示剂,用溴酸钾标准溶液滴定As.实验证明,此法是测定矿石中常
该课题应用RAPD分析技术研究氮离子甜菊种子引起的基因组DNA变异以及在营养体繁殖克隆系内,多态性片段的遗传稳定性,同时对氮离子注入甜菊种子引起的生长发育变化及细胞学中