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目的:⑴检测癌-睾丸抗原SSX1-5mRNA在脑膜瘤和肝细胞癌(HCC)组织中表达情况,以及用于脑膜瘤和HCC免疫治疗的可能性。⑵构建SSX4重组质粒,为体外表达SSX4蛋白奠定基础。方法:⑴采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测69例脑膜瘤组织、61例HCC组织及52例相应的HCC癌旁组织中癌-睾丸抗原SSX1-5mRNA的表达情况,并结合临床相关指标进行统计学分析。随机抽取PCR阳性产物进行DNA测序。⑵以正常睾丸cDNA为模板,用RT-PCR技术扩增SSX4基因KRAB区片段,将该片段插入表达载体pMAL-C2中,并通过蓝白斑实验、酶切、PCR和DNA测序筛选和鉴定阳性克隆。结果:⑴69例脑膜瘤组织中,SSX1和SSX2mRNA表达率分别为1.5%(1/69),未检测到SSX3-5的表达。61例HCC组织中,SSX1、SSX2、SSX4和SSX5mRNA的表达率分别为42.6%(26/61)、8.2%(5/61)、39.3%(24/61)和6.6%(4/61);未检测到SSX3的表达。HCC组织中,至少表达1个SSX基因者达50.8%(31/61);表达2个或2个以上者达32.8%(20/61);表达3个或3个以上者达9.8%(6/61);同时表达4个者达3.3%(2/61)。在52例相应的HCC癌旁组织中无一例表达SSX1-5。在HCC组织中,门静脉癌栓形成与SSX1的表达、患者的年龄与SSX4的表达均具有显著性差异(P<0.05)。DNA测序证实PCR阳性产物为目的基因。⑵对阳性克隆进行PCR、酶切及DAN测序鉴定,证实SSX4目的片段已正确插入表达载体。结论:⑴SSX1、SSX2、SSX4和SSX5在HCC组织中表达频率不尽相同,但具有较强的特异性,提示有可能成为HCC免疫治疗的靶抗原。⑵成功构建SSX4重组质粒,为进一步体外表达SSX4蛋白奠定基础。