目的:观察双氢青蒿素对人卵巢癌顺铂耐药细胞SKOV3/CDDP的体外影响,并检测双氢青蒿素作用于SKOV3/CDDP细胞Livin、P-gp、Topo-Ⅱβ蛋白的表达变化。探讨双氢青蒿素对卵巢癌耐药细胞SKOV3/CDDP的作用机制。方法: 1体外培养人卵巢癌细胞SKOV3及耐药细胞SKOV3/CDDP,采用MTT比色法检测双氢青蒿素和顺铂对细胞增殖抑制和耐药逆转的作用。2流式细胞技术测定双氢青蒿素和顺铂对SKOV3/CDDP细胞周期分布和凋亡的影响。3经Giemsa染色光学显微镜观察SKOV3/CDDP细胞的形态学改变。4细胞免疫化学法分析双氢青蒿素和顺铂干预后SKOV3/CDDP细胞Livin、p-pg、Topo-Ⅱβ蛋白的表达变化。结果: 1顺铂对SKOV3 /CDDP细胞的IC₅₀为34.12mg/L ,是对SKOV3细胞的(IC₅₀ 7.52mg/L)4.54倍。2不同浓度的双氢青蒿素对两种细胞的抑制作用随浓度的增加而增强,呈明显的剂量依赖性,组间比较差异具有显著性（P<0.05）;同一浓度作用于两种细胞,抑制作用的差异无显著性（P>0.05）。双氢青蒿素对于SKOV3细胞的IC₅₀为27.45μmol/L,对SKOV3/CDDP细胞的IC₅₀为29.22μmol/L。3双氢青蒿素联合顺铂作用于SKOV3细胞,使顺铂IC₅₀由单用时的7.52 mg/L,下降到2.16 mg/L。对SKOV3/CDDP细胞,双氢青蒿素10μmol/L联合顺铂,使顺铂的IC₅₀由单一用药时的34.12mg/L下降为15.25mg/L,逆转倍数2.24;双氢青蒿素20μmol/L联合顺铂使顺铂的IC₅₀下降为4.83mg/L,逆转倍数7.06。4药物作用SKOV3/CDDP细胞48h后,双氢青蒿素组和顺铂联合双氢青蒿素组在细胞周期G1期前均出现亚二倍体的凋亡峰,而顺铂2.5mg/L组无明显凋亡峰出现。S期细胞比例下降,G0/G1期细胞比例上升,凋亡率增高,药物浓度越高,该作用越强,联合用药比单独用药时更加明显（P<0.05）。5药物作用24h后,培养液均清亮,对照组细胞生长密集,光泽度好;各加药组细胞密度均较对照组低,光泽度下降。48h后可见对照组细胞已有重叠生长,而双氢青蒿素组及联合用药组细胞贴壁率下降,培养液浑浊,出现细胞凋亡的特征,如细胞数减少,稀疏,细胞形态破坏,缩小,变圆,胞膜破裂,胞核出现肿胀、碎裂、核固缩等。上述细胞凋亡变化随着药物浓度的升高变化更为明显。6 Livin、P-gp蛋白在SKOV3/CDDP细胞呈强阳性表达,较在SKOV3细胞高;而Topo-Ⅱβ蛋白则呈低表达,与SKOV3细胞比较明显偏低,均有显著差异（P<0.01）。7 SKOV3/CDDP细胞经不同浓度的药物干预,随药物浓度增加,各剂量组Livin、P-gp阳性反应物强度明显降低,染色变淡,而Topo-Ⅱβ阳性细胞数增加,染色加深。Livin、P-gp蛋白表达逐渐减弱,而Topo-Ⅱβ蛋白的表达逐渐增强。与用药前比较,有统计学意义（P<0.05）。结论:1双氢青蒿素对人卵巢癌细胞SKOV3及顺铂耐药细胞SKOV3/CDDP的增殖具有明显抑制作用,且呈剂量依赖性。2双氢青蒿素能将SKOV3/CDDP细胞阻滞于G0/G1期,即影响肿瘤细胞DNA的合成,在细胞周期G1期前出现了明显亚二倍体凋亡峰,说明其同时诱导肿瘤细胞凋亡。3双氢青蒿素可通过阻滞细胞周期、下调Livin和p-gp蛋白表达、上调Topo-IIβ表达从而发挥抑制增殖和诱导凋亡作用,同时可以增强卵巢癌耐药细胞对顺铂的敏感性,逆转肿瘤细胞耐药。本实验仅仅只是初步的研究,其确切机制,有待进一步深入研究。