粗毛栓菌作为一种白腐真菌,可以有效地降解自然界中广泛存在的木质素,在环境保护和资源再生领域都有着相当广泛的应用前景。在生物体内,ATP合酶是能量代谢的关键酶,参与生命体中的多种光合磷酸化以及氧化磷酸化反应。其中atp9基因的功能是负责编码ATP合酶A亚基上的第9亚单位,是编码ATP合酶基因的重要组成部分,这部分基因片段的功能与呼吸作用和光合作用有相当密切的关联。由于atp9基因在进化过程中高度保守,本研究根据已知近缘真菌的基因序列,设计并合成了一对引物,由粗毛栓菌的mRNA反转录从而得到cDNA,以此第一链作为模板,利用PCR技术得到粗毛栓菌的编码部分ATP合酶的atp9基因的完整序列,并将其连接于已处理好的原核表达载体上。此后进行了一系列的测序与进化分析的结果表明：该克隆片段全长222个碱基对,一共编码了73个氨基酸,其翻译的蛋白质的分子量为7.35kD。转化大肠杆菌后经IPTG(异丙基硫代半乳糖苷)诱导,能够快速且高效地表达所需的外源融合蛋白,其产物的分子量大小与预测结果对比一致。经过同源比对和进化树分析,该克隆基因编码的氨基酸序列与拉丁名为Crinipellis perniciosa和Trametes cingulata strain ATCC26747的可可丛枝病菌、瓣环栓菌的相似度最高。本实验为未来进一步研究粗毛栓菌atp9基因和其编码的蛋白功能以及阐释其调控和作用机制奠定了基础。