黑水缬草石油醚部位改善睡眠作用及相关机制研究

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黑水缬草为败酱科(Valerianaceae)缬草属(Valeriana)植物黑水缬草(Valeriana amurensis Smir. ex Kom.)的干燥根及根茎,本课题组前期研究发现黑水缬草石油醚部位具有改善小鼠睡眠作用。本实验将在此基础上进一步研究该部位对小鼠和果蝇睡眠的改善作用,考察其对小鼠脑内和果蝇头部神经递质GABA及5-HT含量的影响,初步探讨其改善睡眠的作用机制。采用戊巴比妥钠协同作用实验,考察黑水缬草石油醚部位不同剂量对小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间的影响以及联合氟马西尼注射液、5-HTP和PCPA对小鼠睡眠潜伏期和睡眠时间的影响;采用DAMS监测系统考察黑水缬草石油醚部位对果蝇睡眠时间的影响以及量效和时效关系;采用果蝇睡眠剥夺模型考察黑水缬草石油醚部位对其睡眠时间的影响;采用ELISA法测定小鼠头部以及果蝇头部GABA和5-HT含量,以确定黑水缬草石油醚部位改善睡眠的作用机制。实验结果表明:1.黑水缬草石油醚部位三个剂量(30g·kg-1,15g·kg-1,7.5g·kg-1)均具有改善小鼠睡眠的作用,主要表现为缩短睡眠潜伏期和延长睡眠时间;2.联合氟马西尼注射液,5-HTP和PCPA后,对小鼠的睡眠时间均产生了明显的影响:与空白组比较,联合氟马西尼注射液给药后,阻断了黑水缬草石油醚部位和地西泮与戊巴比妥钠的协同作用;联合5-HTP给药后,增强了黑水缬草石油醚部位与戊巴比妥钠的协同作用;联合PCPA给药后,阻断了黑水缬草石油醚部位与戊巴比妥钠的协同作用;3.黑水缬草石油醚部位不同剂量均能使小鼠头部的神经递质GABA和5-HT含量升高。4.黑水缬草石油醚部位对果蝇睡眠时间影响的量效和时效关系如下:量效方面:雌性果蝇随给药浓度的逐渐升高,睡眠时间逐渐延长,其中4%和8%组与空白对照组比具有显著性差异,故选择8%为雌果蝇的最佳给药浓度;雄性果蝇在药物浓度0.5%-4%范围内,睡眠时间呈上升趋势,在4%药物浓度后虽然剂量升高,但睡眠时间不再升高,故选择4%的药物浓度为雄果蝇最佳给药浓度时效方面:雌性果蝇以最佳浓度给药1-4天范围内,睡眠时间呈上升趋势,给药4-7天睡眠时间呈下降趋势,故雌性果蝇的最佳给药时间为4天;雄性果蝇给药1-2天范围内睡眠时间呈上升趋势,给药2天后睡眠时间逐渐下降,所以雄性果蝇的最佳给药时间为2天。5.黑水缬草石油醚部位能延长睡眠剥夺模型果蝇(光照剥夺、机械剥夺)的睡眠时间。6.黑水缬草石油醚部位对果蝇头部GABA的含量影响不明显,但能显著升高果蝇头部5-HT的含量。
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