甘蔗是重要的糖料和能源作物。蔗汁里含有的花青素不仅具有保健功能,而且是天然色素,其合成途径在多种高等植物包括甘蔗中广泛存在。花青素转录因子基因对于调控花青素的合成具有关键作用。克隆和鉴定花青素转录因子基因对于培育高花青素植物品种和建立新型的遗传转化可视化示踪体系具有重要作用。甘蔗花青素转录因子基因研究尚处于起步阶段。本研究根据玉米花青素转录因子SN和RS基因序列设计引物,利用同源克隆技术,得到甘蔗花青素转录因子ScSN和ScRS基因的全长序列。在ScSN和ScRS序列两端分别添加Kpn Ⅰ、Sal Ⅰ酶切位点,构建植物表达载体pCAMBIA1301-35SN,包被微粒载体通过基因枪对甘蔗愈伤组织进行轰击,转化的愈伤组织明显呈紫红色,将紫红色愈伤组织分化培养获得再生甘蔗植株,经PCR检测,ScRS和ScSN基因呈阳性。初步证实克隆的ScRS和ScSN基因转化甘蔗可以使愈伤组织显色。烟草叶片瞬时表达,叶片颜色没有发生明显变化。主要研究结果:(1)从甘蔗分离到的基因,进行克隆、测序,并在NCBI上BLAST,发现其核酸序列及氨基酸序列与已发表的花青素转录因子序列具有较高的同源性,初步确认在甘蔗上克隆的两个基因ScRS和ScSN是花青素转录因子基因;(2)成功构建了植物表达载体pCAMBIA1301-35SN-ScSN和pCAMBIA1301-35SN-ScRS;(3)通过基因枪轰击,将目的基因转化到甘蔗愈伤组织内,使愈伤组织的颜色发生了明显变化,初步确定克隆的两个基因具有使甘蔗愈伤组织显色的功能;(4)选择紫色愈伤组织经分化获得了再生植株,通过分子检测成功筛选得到了转基因甘蔗植株。