柑橘黄龙病（Citrus Huanglongbing,HLB）是危害全球柑橘产业健康发展的最严重的病害之一,其病原为韧皮部限制性细菌。迄今为止,因纯培养极难获得而限制了其致病分子机制的研究。本试验根据已经报道的细菌激发子特点,从黄龙病菌亚洲菌株（Candidatus Liberibacter asiaticus,CaLas）全基因序列中选取假定激发子基因,通过构建植物表达载体后接种本氏烟（Nicotiana benthamian）瞬时表达,并观察是否在本氏烟上引起过敏性坏死反应（Hypersensitive response,HR）;通过对氧爆发、胼胝体沉积及防卫基因表达分析,对假定激发子基因进行进一步鉴定。本研究取得到主要结果如下:1.CaLas中候选激发子基因的克隆及植物表达载体的构建:采用Gateway技术分别成功构建了含有候选基因（Omp,Omp1,Omp2,Mot A,F/mot B,Hly,Sly）的入门载体及目的载体psk103,并热击转化至根癌农杆菌GV3101,通过对插入基因序列测定确认插入基因方向和序列均正确无误。2.采用真空渗透注射接种本氏烟,室温培养,定期观察症状。分析结果显示:7个候选基因构建中,只有Omp1基因构建的植物表达载体（Omp1-103）能够诱导本氏烟产生明显的HR表型反应,接种后8天时已完全坏死,而其他基因没有明显的HR表型反应。3.在荧光显微镜下可观察到在接种48h能诱导本氏烟产生胼胝体沉积。在接种0.5h和5h后采用DAB染色检测ROS反应,接种5h时的氧化物的积累明显高于0.5h时。4.采用荧光定量PCR检测10个本氏烟中HR标志基因表达情况,解释激发子诱导HR可能的信号途径。结果显示,在光合作用做扮演重要角色的Plastovyanin和信号蛋白EDS1在0.5 dpi呈上调表达。检测到与植物先天免疫有关的PR1a在2 dpi呈上调表达,而PR-Q在2 dpi至4 dpi呈上调表达。ACRE31和对ROS产物至关重要的Rboh B在0.5 dpi至4 dpi显示上调表达,相对表达量在2 dpi均达最高值。TOBPAL和SIPK基因在0.5 dpi至4 dpi均呈现下调表达。5.Omp1基因跨膜结构域功能验证。对Omp1基因编码的蛋白结构进行分析,并构建缺失跨膜功能区的缺失突变体,多次重复接种至本氏烟观察并未观察到HR。推测跨膜结构域是Omp1基因在烟草中引起HR的关键因子。通过上述试验,证实CaLas外膜蛋白基因Omp1具有激发子活性,可诱导本氏烟产生明显的HR,并激活相应的防卫基因信号表达途径,对后续调取互作蛋白、阐明互作机制奠定了基础。