粉红粘帚霉QST-98固态发酵条件及制剂研究

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粉红粘帚霉QST-98(Clonostachys rosea QST-98)是本实验室经过诱变得到的高效生防菌株,具有许多优良特性,能有效防控番茄灰霉病、小麦纹枯病、大豆菌核病等植物病害。本文旨在筛选出粉红粘帚霉最佳发酵培养基配方,对粉红粘帚霉孢子可湿性粉剂进行了工艺和处方研究,为工业化生产提供工业参数并降低成本。本实验在实验室前期筛选出的发酵培养基配方和自制的发酵器基础上对粉红粘帚霉固态发酵产孢子的条件进行了筛选。首先通过单因素试验初步确定了对菌株产孢子影响较大培养基厚度、温度和开孔率三个因素,然后利用响应面和Box-Benhnken模型对粉红粘帚霉的固态发酵培养条件进行了筛选和优化,最终得到了最优条件:培养温度24℃、初始pH7.0、开孔率0.74%、培养基厚度3cm、光照条件下采用前三代菌种。最终发酵产孢量可达9.93×109个/克干培养基,最佳发酵时间缩短为10天,大大节省了工业化生产成本。对粉红粘帚霉孢子可湿性粉剂的制备工艺和处方进行了研究。本实验通过对孢子回收方法、打碎时间、干燥温度等工艺条件进行探索实验得出了得到原料药孢子粉的最合适工艺条件;通过生物相容性试验和单因素试验确定了所选用的助剂种类和大体比例;考虑各种助剂之间的相互作用,通过对各种助剂设计正交试验,得出了最终的最优配方:硅藻土:孢子粉=5:1;木质素磺酸钠6%;荧光素钠1%,孢子打碎时间20s,烘干温度35℃通过对润湿时间、悬浮率、过筛率等的检测表明该粉红粘帚霉可湿性粉剂的性能指标基本符合要求,研究了贮藏条件对稳定性影响,粗略发现对萌发率、悬浮率、润湿时间影响不大。得到结果为:润湿时间53.94s,悬浮率82.34%,过筛率94.52%,水分1.68%,贮藏45天后萌发率为91.3%,均符合国家要求。
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