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目的:观察mi R-106b的表达水平变化对人早幼粒白血病细胞株(HL-60)细胞生物学特性的影响。方法:采用mi R-106b的类似物mi R-106b mimic(高表达组),抑制物mi R-106b inhibitor(低表达组)及mi R-106b control(对照组)转染HL-60细胞,q RT-PCR检测各组细胞mi R-106b表达变化。分别于转染后第24 h、48 h、72 h收集细胞,MTT比色法检测三个组细胞增殖情况,流式细胞仪结合Annexin V/PI双染色检测细胞的凋亡率。结果:q RT-PCR检测高表达组、低表达组、对照组mi R-106b的表达水平发现:低表达组mi R-106b表达量在48 h、72 h分别是对照组的0.53和0.45倍(P<0.05),高表达组mi R-106b表达量是对照组的1.52和1.56倍(P<0.05)。Mi R-106b inhibitor转染HL-60细胞48 h、72 h后,细胞增殖较对照组明显被抑制(P<0.05),而高表达组、对照组及正常组三组间细胞增殖状况无明显差异。同时mi R-106b低表达组较对照组HL-60细胞凋亡明显增加(P<0.05)。结论:Mi R-106b低表达可抑制粒细胞增殖,促进其凋亡。目的:研究mi R-106b调控HL-60细胞凋亡的靶向调控基因及其作用的细胞内信号通路。方法:通过在线核酸数据库(Genebank)检索获取mi R-106b的成熟序列,预测与细胞凋亡信号通路密切相关的靶向基因及其3’非编码区结合位点(3’UTR)、预测mi R-106b与靶基因结合自由能等生物信息。通过构建双荧光素酶报告基因载体,进行荧光素酶实验鉴定检测软件预测的靶基因。运用RT-PCR和Western blot检测实验各组预测靶基因m RNA及蛋白的表达变化。并采用Western blot检测靶蛋白的下游调控蛋白表达的影响。结果:在成功获取mi R-106b成熟序列和PTEN 3’UTR序列基础上,通过在线软件分析证实mi R-106b与PTEN有理想的相互作用位点及较低的结合自由能。mi R-106b mimic与野生型psi CHECK?-2-PTEN-WT 3’UTR共转染后抑制荧光素酶活性,而突变型psi CHECK?-2-PTEN-Mut 3’UTR共转染后荧光素酶活性无明显变化。与对照组相比较,RT-PCR检测发现抑制mi R-106b在细胞内的表达能导致PTEN m RNA表达水平增高。蛋白印记检测结果显示随着细胞内mi R-106b表达被抑制,PTEN蛋白表达呈现增高趋势,PTEN的下游调控蛋白p-Akt表达下调,BAD、caspase-3表达水升高。结论:Mi R-106b通过对靶基因PTEN的表达调控,影响凋亡信号通路p-Akt/BAD/caspase-3导致粒细胞凋亡。