血栓是血流在血管内面剥落处或修补处的表面所形成的小块,主要是由不溶性的纤维蛋白组成,纤溶酶可以溶解纤维蛋白,从而使血管通畅,防止血栓类疾病的发生。目前应用于临床的溶栓药物成本较高,且副作用大,因此寻求安全有效的溶栓剂是近些年研究的热点。本文测定了产纤溶酶的海洋放线菌菌株MY0504的生长曲线及产酶曲线,确定发酵时间为4.5天。通过单因素试验确定了最适碳源、氮源、装液量、接种量及各无机盐浓度水平。在单因素试验基础上,通过Plackett-Burman设计从影响发酵液酶活的8个因素中选出了葡萄糖、酵母粉、温度3个显著性因素,用最陡爬坡试验将3个因素的取值趋近中心点,然后通过Box-Behnken响应面设计得到3个因素的最优值。在优化后的发酵条件下,发酵液酶活达到2190.6 U/mL,是优化前的4倍。尝试了盐析、离子交换层析、疏水层析、凝胶过滤层析等多种分离纯化方法,确定了纤溶酶的纯化流程为:发酵原液离心除菌体、711树脂吸附色素、盐析、PhenylμSphere疏水层析、Sephadex G-75凝胶层析。最后纤溶酶比活力达到11000.0 U/mg,纯化倍数为101.3倍,回收率为26.1%。对此纤溶酶的部分性质进行了初步探索,发现其分子量约为32 kDa,等电点约为8.5。发酵液中的纤溶物质单纯为纤溶酶,不含纤溶酶原,也不含有纤溶酶原激活物,此纤溶酶可在短时间内有效降解纤维蛋白原的α链、β链及γ链,溶栓性较强,溶栓效率高。