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本研究旨在研制高存活率高活性益生菌制剂,并应用于肉鸡以验证其作用。1.益生菌制剂制备工艺筛选本试验以乳酸菌为试验菌,以其存活率和水分含量为指标,采用低温喷雾干燥技术制备出乳酸菌制剂,通过单因素试验和正交试验优化设计,得到该制剂生产的最佳工艺条件为:进风温度为140℃,出风温度为55℃、固形物浓度为20%,该条件下制备的乳酸菌菌制剂活菌总数高达1.28×1012 CFU/g,水分含量为3.7%,储存期1年。2.益生菌制剂筛选分别取3种不同配比的混合益生菌制剂(包括乳酸菌、酵母菌和芽孢杆菌),编号分别为1号、2号和3号,各制剂分别饲喂80只1日龄健康公雏肉鸡,随机分成4组,每个组设2个重复,每个重复组10只鸡。日粮组成分别为:对照组:只给肉鸡饲喂基础饲粮;试验组一:给肉鸡饲喂基础饲粮+1%的1号复合益生菌制剂,试验组二:给肉鸡饲喂基础饲粮+1%的2号复合益生菌制剂,试验组三:给肉鸡饲喂基础饲粮+1%的3号复合益生菌制剂。研究结果表明:整个试验期间(1~42天),1号试验组的采食量和体增重分别比对照组高3.38%和6.91%(P<0.05),饲料转化率提高了8.05%(P<0.05),说明1号益生菌制剂能显著提高肉鸡的生产性能。试验组一鸡肉中干物质、粗蛋白和表观代谢能较对照组均有显著提高(P<0.05),说明1号益生菌制剂可以提高肉鸡对饲料的转化率。而2号复合益生菌和3号复合益生菌的采食量、体增重和饲料转化率较对照组增加均不显著(P>0.05)。3.1号制剂的免疫增强作用研究在肉鸡42日龄时,试验组肉鸡的胸腺、脾脏和法氏囊指数分别显著高于对照组27.2%、35.7%和65.2%,说明在基础日粮中添加1号益生菌制剂可有效刺激肉鸡的脾脏、胸腺和法氏囊等免疫器官的发育。血液生化指标检测发现,1号益生菌制剂对肉鸡的血糖影响较小,在不损伤肝脏的情况下,增加了总蛋白含量,提高了机体的循环抗体水平。本试验还研究了1号益生菌制剂对肉鸡抗体水平的影响。在发酵床的垫料中植入1号益生菌制剂,肉鸡在发酵床中自由活动、自由饮食,分别检测不同日龄(40日龄、70日龄和100日龄)肉鸡血清中的新城疫抗体和禽流感H9抗体水平。结果表明,发酵床中饲养肉鸡的新城疫和禽流感抗体水平均比普通地面养殖的肉鸡高出约2个滴度(P<0.05)。4.1号制剂的抗肠道菌感染作用研究本试验旨在研究1号益生菌制剂抗肉鸡大肠杆菌的感染。研究结果表明,攻毒强毒大肠杆菌菌液后,在肉鸡42日龄时,阴性对照组(A组)、阳性对照组(B组)、益生菌制剂组(C组)三组的死亡率分别为7.78%、73.78%和21.11%(P<0.05),说明1号益生菌制剂可以降低大肠杆菌感染的死亡率。在肉鸡35日龄时注射大肠杆菌,C组大肠杆菌数量分别比A、B组低80.76%和83.27%(P<0.05);C组的乳杆菌数量分别比A、B组高277.79%和292.55%(P<0.05)。在肉鸡42日龄时,B组大肠杆菌数量分别是A、C组的4.93倍和4.74倍(P<0.05);C组的乳杆菌数量分别是A、B组的2.91倍和4.07倍(P<0.05),说明1号益生菌制剂不仅促进乳杆菌的繁殖,而且抑制大肠杆菌的生长。在肉鸡35日龄时人工感染注射大肠杆菌,C组盲肠内容物sIg A含量分别比A、B组高出14.08%和12.36%(P<0.05);42日龄时,C组盲肠内容物sIg A含量分别比A、B组高出12.95%和25.34%(P<0.05);Ig G含量分别比A、B组高出15.02%和22.90%差异性显著(P<0.05),说明1号益生菌制剂可以增强肠道黏膜免疫水平,提高体液免疫水平。在肉鸡35日龄时注射大肠杆菌,3组之间的IL-2和IL-6含量差异性均不显著(P>0.05)。42日龄时,B组的IL-2含量显著低于C组(P<0.05);B组的IL-6含量显著高于A、C组,A组的IL-6含量与C组的差异性不显著(P>0.05),说明1号益生菌制剂可促进IL-2分泌,抵抗大肠杆菌的感染。