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本课题基于“一锅法”简单制备的新型纳米复合物、便携式血糖仪等，开发了三种检测大肠杆菌O157:H7简便、快速、灵敏和低成本的方法：
(1)基于刀豆蛋白-转化酶-磷酸钙纳米花和血糖仪，建立大肠杆菌O157:H7检测方法
通过“一锅法”制备了球形刀豆蛋白(Con A)-转化酶-磷酸钙有机-无机纳米花(CIP)，作为检测大肠杆菌O157:H7新型信号探针。CIP中刀豆蛋白与大肠杆菌结合，转化酶促使蔗糖转化为葡萄糖，并直接使用便携式血糖仪进行定量。结果表明，该方法对大肠杆菌O157:H7测定的线性范围为102~107CFU/mL，检测限为82CFU/mL。牛奶样品中的回收率在97.5~105.4%之间。
(2)基于抗菌肽-磷酸盐纳米花和血糖仪，建立大肠杆菌O157:H7检测方法
大肠杆菌O157:H7特异性抗菌肽magaininsI作为有机成份，通过“一锅法”制备magaininsI-Cu3(PO4)2有机-无机纳米花，并将Fe3O4纳米颗粒嵌入纳米花中，用作此检测方法磁性分离的“捕获”探针(MMPs)；大肠杆菌O157:H7特异性抗菌肽crocropinP1和转化酶作为有机成份，通过“一锅法”制备crocropinP1-转化酶-Ca3(PO4)2有机-无机纳米花，用作此方法信号探针(PIPs)。在靶标大肠杆菌O157:H7存在下，形成MMPs-细菌-PIPs夹心结构。磁分离后，信号探针中转化酶将蔗糖水解为葡萄糖，而后便携式血糖仪定量。在最佳条件下，该方法的线性范围为10到107CFU/mL，检出限为10CFU/mL。
(3)基于DNA纳米结构为信号标签，建立大肠杆菌O157:H7电化学适配体传感器
通过滚环扩增反应合成茧状DNA纳米结构，并负载血红素(Hemin)，用作此电化学检测方法的信号标签。首先，通过Au-S键在Au电极上修饰了单链DNA捕获探针。大肠杆菌O157:H7特异性适配体和捕获探针在Au电极上形成dsDNA结构。在大肠杆菌O157:H7存在下，适配体优先结合大肠杆菌O157:H7，导致适配体-捕获探针解离，并释放捕获探针。随后，自由的捕获探针通过互补的DNA序列捕获信号检签。在最佳条件下，电化学信号的变化与大肠杆菌O157:H7浓度的对数成正比。该方法的线性范围为10~106CFU/mL，检出限为10CFU/mL。
(1)基于刀豆蛋白-转化酶-磷酸钙纳米花和血糖仪，建立大肠杆菌O157:H7检测方法
通过“一锅法”制备了球形刀豆蛋白(Con A)-转化酶-磷酸钙有机-无机纳米花(CIP)，作为检测大肠杆菌O157:H7新型信号探针。CIP中刀豆蛋白与大肠杆菌结合，转化酶促使蔗糖转化为葡萄糖，并直接使用便携式血糖仪进行定量。结果表明，该方法对大肠杆菌O157:H7测定的线性范围为102~107CFU/mL，检测限为82CFU/mL。牛奶样品中的回收率在97.5~105.4%之间。
(2)基于抗菌肽-磷酸盐纳米花和血糖仪，建立大肠杆菌O157:H7检测方法
大肠杆菌O157:H7特异性抗菌肽magaininsI作为有机成份，通过“一锅法”制备magaininsI-Cu3(PO4)2有机-无机纳米花，并将Fe3O4纳米颗粒嵌入纳米花中，用作此检测方法磁性分离的“捕获”探针(MMPs)；大肠杆菌O157:H7特异性抗菌肽crocropinP1和转化酶作为有机成份，通过“一锅法”制备crocropinP1-转化酶-Ca3(PO4)2有机-无机纳米花，用作此方法信号探针(PIPs)。在靶标大肠杆菌O157:H7存在下，形成MMPs-细菌-PIPs夹心结构。磁分离后，信号探针中转化酶将蔗糖水解为葡萄糖，而后便携式血糖仪定量。在最佳条件下，该方法的线性范围为10到107CFU/mL，检出限为10CFU/mL。
(3)基于DNA纳米结构为信号标签，建立大肠杆菌O157:H7电化学适配体传感器
通过滚环扩增反应合成茧状DNA纳米结构，并负载血红素(Hemin)，用作此电化学检测方法的信号标签。首先，通过Au-S键在Au电极上修饰了单链DNA捕获探针。大肠杆菌O157:H7特异性适配体和捕获探针在Au电极上形成dsDNA结构。在大肠杆菌O157:H7存在下，适配体优先结合大肠杆菌O157:H7，导致适配体-捕获探针解离，并释放捕获探针。随后，自由的捕获探针通过互补的DNA序列捕获信号检签。在最佳条件下，电化学信号的变化与大肠杆菌O157:H7浓度的对数成正比。该方法的线性范围为10~106CFU/mL，检出限为10CFU/mL。