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目的:以大鼠多巴胺能神经元细胞系（简称“N27”细胞）构建慢病毒细胞稳转株,探讨mi RNA-nov-1/Dhrs3在锰致N27细胞凋亡中的调控机制,以及m TOR信号通路关键分子变化的特点,进一步阐明锰致神经毒性的分子机制。方法:1.N27细胞分为以下2组:Mn Cl20μmol/L（空白对照组,Control组）、300μmol/L（模型组,Model组）24h。CCK8检测细胞活力,Western blot检测Dhrs3、凋亡相关蛋白（Caspase-3、Cleaved-caspase-3）和m TOR信号通路相关蛋白（m TOR、p-m TOR、p-S6K1、S6K1、p-4E-BP1、4E-BP1、p-Akt、Akt）的表达;RT-q PCR检测mi RNA-nov-1、Dhrs3 m RNA的表达;核酸序列比对软件预测mi RNA-nov-1与Dhrs3的结合位点。2.将N27细胞分为以下7组:空白对照组（Control组）、模型组（Model组）、锰+慢病毒空载组（NC组）、锰+mi RNA-nov-1过表达组（mi RNA-nov-1 up组）、锰+mi RNA-nov-1低表达组（mi RNA-nov-1 sponge组）、锰+沉默Dhrs3组（sh-Dhrs3组）、锰+mi RNA-nov-1低表达+Dhrs3沉默组（mi RNA-nov-1sponge+sh-Dhrs3组）。各组染锰剂量均为最佳染锰浓度（300μmol/L）,染毒时间24h。用倒置显微镜观察各组的细胞形态;流式细胞仪检测细胞凋亡（Annexin V/PI双染色法）;Hoechst 33324荧光染色法检测细胞凋亡率;Western blot检测Dhrs3、Caspase-3和m TOR信号通路相关蛋白（m TOR、p-m TOR、p-S6K1、S6K1、p-4E-BP1、4E-BP1、p-Akt、Akt）的表达;RT-q PCR检测mi RNA-nov-1、m TOR、S6K1、4E-BP1、Akt m RNA的表达。结果:1.CCK8实验发现,锰对N27细胞活性的影响呈剂量效应关系,细胞的活性随剂量的增加而下降。Western blot结果显示,与Control组相比,Model组Dhrs3表达下降（P＜0.05）,凋亡相关蛋白（Caspase-3、Cleaved-caspase-3）和m TOR信号通路磷酸化蛋白（p-m TOR、p-S6K1、p-4E-BP1、p-Akt）的表达增加（P＜0.05）,总蛋白（m TOR、S6K1、4E-BP1、Akt）的表达不变（P＞0.05）。RT-q PCR结果显示,与Control组相比,Model组的mi RNA-nov-1表达上调,Dhrs3表达下调,差异具有统计学意义（P＜0.05）。核酸序列比对软件预测mi RNA-nov-1与Dhrs3存在结合位点。2.Western blot结果显示,与Model组和NC组相比,mi RNA-nov-1 up组和sh-Dhrs3组的Caspase-3、p-m TOR、p-Akt、p-S6K1、p-4E-BP1表达增加（P＜0.05）;mi RNA-nov-1 sponge组的Caspase-3以及p-m TOR、p-Akt、p-S6K1、p-4E-BP1表达降低（P＜0.05）;mi RNA-nov-1 sponge+sh-Dhrs3组的Caspase-3以及p-m TOR、p-Akt、p-S6K1、p-4E-BP1表达量无明显差异（P＞0.05）。与Model组和NC组相比,mi RNA-nov-1 up组和sh-Dhrs3组的Dhrs3表达下降（P＜0.05）;mi RNA-nov-1 sponge+sh-Dhrs3组的Dhrs3表达量无明显差异（P＞0.05）。RT-q PCR结果显示,与Control组相比,其它6组mi RNA-nov-1的表达量均增加（P＜0.05）,与Model组和NC组比较,mi RNA-nov-1 up组和sh-Dhrs3组mi RNA-nov-1的表达量增加（P＜0.05）,mi RNA-nov-1 sponge+sh-Dhrs3组mi RNA-nov-1表达无显著差异（P＞0.05）。与Control组相比,Model、NC、mi RNA-nov-1 sponge、sh-Dhrs3、mi RNA-nov-1 sponge+sh-Dhrs3组的m TOR、Akt、S6K1 m RNA表达无显著差异（P＞0.05）。Annexin V/PI双染流式细胞术检测结果显示,与Control组比较,其它6组的凋亡率明显升高（P＜0.05）,与Model组和NC组相比,mi RNA-nov-1 up组和sh-Dhrs3组N27细胞的凋亡率明显升高（P＜0.05）;mi RNA-nov-1 sponge组细胞的凋亡率明显下降（P＜0.05）;mi RNA-nov-1 sponge+sh-Dhrs3组的凋亡率无显著差异（P＞0.05）。Hoechst 33324荧光染色法检测结果显示,与Control组比较,其它6组细胞核呈致密浓染的凋亡细胞明显增多,与Model组和NC组相比,mi RNA-nov-1 up组和sh-Dhrs3组N27细胞的凋亡率明显升高;mi RNA-nov-1sponge组细胞的凋亡率明显下降;mi RNA-nov-1 sponge+sh-Dhrs3组的凋亡率无显著性变化。结论:1.锰致N27细胞凋亡中mi RNA-nov-1表达上调,Dhrs3表达下调;2.mi RNA-nov-1可能通过负向调节Dhrs3激活m TOR信号通路促进锰诱导的N27细胞凋亡。