超声辅助双水相提取金龙胆草中苦蒿素及其体外活性研究

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金龙胆草(Conyza blinii Lévi.)为菊科白酒草属草本植物,主要用于各种炎症疾病的治疗。二萜是白酒草属植物的特征性成分,苦蒿素是金龙胆草中含量最高的二萜类化合物,同时是金龙胆草所特有的物质,对于胃溃疡具有良好的治疗效果。当前,对于金龙胆草中苦蒿素的研究不多,提取苦蒿素的效率不高。故本文采用超声辅助双水相提取金龙胆草中苦蒿素,然后采用大孔树脂进行初步纯化,最后检测纯化前后的体外抗氧化活性及抑菌性能,为后续对于苦蒿素的研究提供一份数据支持。研究结果如下:(1)金龙胆草中苦蒿素的最佳提取条件为:以丙醇:磷酸二氢钠:水质量比为16:30:54的溶剂作为最佳提取溶剂,超声提取时间为21.5 min,功率为400 W,温度55℃,液料比25:1 m L/g,最高提取率为14.63 mg/g。另外,放大试验中,提取时间为30 min时提取率为14.43 mg/g,接近放大前提取率,证明该方法具有工业化生产潜力。(2)初步纯化最佳工艺为:采用S-8型大孔树脂,上样200 m L稀释15倍的初提液,再用220 m L 50%乙醇以1.0 m L/min的速度进行洗脱,最终苦蒿素的回收率为82.38%,含量为18.12%。(3)纯化前后的苦蒿素溶液均有较强的体外抗氧化能力,对于ABTS、超氧阴离子和羟基自由基的清除能力均优于Vc,高浓度时对于DPPH自由基的清除能力与Vc相近。纯化后的初提液对于羟基自由基的清除能力有明显提升。(4)初提液纯化前后对于金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌和枯草芽孢杆菌均有明显的抑制作用,抑制能力为金黄色葡萄球菌>肺炎双球菌>枯草芽孢杆菌。初提液在20mg/m L时对于金黄色葡萄球菌、肺炎双球菌和枯草芽孢杆菌的滤纸片抑菌法中,抑菌圈直径大小为13.5、12.7、10.1 mm,经过纯化后抑菌效果明显提升,抑菌圈大小分别为为14.3、13.8、10.8 mm。在三种菌生长曲线实验中,前12 h对于三种菌的生长有明显抑制作用,且抑菌能力与抑菌圈结果一致。
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