新疆位于我国西北部,面积占全国1/6,与国内5省毗邻,与8个国家接壤,地理位置重要。新疆媒介种类较多,蜱类是当地主要媒介物种之一,因为其分布广泛,且与人畜及野生动物关系密切,由此推测,新疆可能存在多种虫媒病毒(病)。已知我国有乙型脑炎、登革热、森林脑炎和新疆出血热4种虫媒病毒病流行,其中森林脑炎和新疆出血热在新疆存在自然疫源地。近年来在新疆进行的虫媒病毒调查中已经从蚊和蜱类中分离出辛德毕斯、东方马脑炎、西方马脑炎、新疆出血热等虫媒病毒。然而,以往的虫媒病毒研究主要报道了璃眼蜱类可作为多种病毒的传播媒介,但在新疆其他蜱类中是否能携带虫媒病毒以及是否有未发现的新病毒及疫源地等都有待于进一步的调查研究。因此,本研究对新疆部分地区采集的蜱类及小型啮齿动物标本进行多种虫媒病毒的分子生物学检测和分离鉴定,对了解当地虫媒病毒分布及指导病毒性疾病的预防控制提供基础资料。本研究结果主要包括以下内容:1、新疆小型啮齿动物携带虫媒病毒的初步调查研究将2013年采集自北疆吉木萨尔县、米东、吐鲁番、布尔津、及南疆若羌地区的210只小型啮齿动物样本,进行分类鉴定后,取其肝、脾、肺进行虫媒病毒的核酸检测。通过RT-PCR的方法对其进行汉坦病毒(HTV)、乙型脑炎病毒(JEV)、西尼罗病毒(WNV)、巨细胞病毒(CMV)、蜱类传脑炎病毒(TBEV)、禽流感病毒(Flu)、新疆出血热病毒(XHFV)和发热伴血小板减少综合征病毒(简称新型布尼亚病毒,SFTSV)核酸特异性检测。结果发现在78组(210只)小型啮齿动物脏器中检测出50组CCHFV S基因片段;54组SFTSV核酸片段。因此,后期我们主要针对新疆蜱类和小型啮齿动物进行SFTSV和XHFV的分子流行病学调查研究及病毒的分离鉴定。2、新型布尼亚病毒的分子流行病学调查及分离鉴定新疆蜱类中新型布尼亚病毒的分子流行病学调查及新病毒的分离鉴定。将2014年采集自新疆乌苏古尔图南山牧场的14726只草原革蜱(Dermacentor nuttalli)和南疆的且末、图木舒克、民丰、于田、尉犁、策勒地区的1277只璃眼蜱(hyalommaasiaticum)进行sftsv核酸检测和全基因组序列分析。将蜱类分为68组(每组100-200只),用rt-pcr的方法进行sftsvs片段核酸特异性检测;从16041只67组草原革蜱中检测出5组sftsvs基因片段;将阳性标本进行细胞培养法分离病毒、间接免疫荧光(ifa)检测、细胞病变(cpe)检测和电镜观察,结果表明,我们获得了1株vero细胞生长繁殖病毒株,该病毒株可与sftsv特异性抗体发生中和反应,电镜下可见球形颗粒,大小为80nm。将分离的病毒株进行全基因组分段测序,用dnastar和mega5.05软件进行同源性和系统进化分析,结果表明该病毒株s、m和l3个基因片段大小分别为1744、3371和6366个核苷酸;s、m和l片段核酸片段序列分别与国内其他地区隶属于白蛉热病毒属的sftsv流行株的序列相似性分别为74%,72%和75-76%,但与白蛉热病毒属中其它病毒的相关序列相比差异较大。系统进化树分析结果表明,该病毒与布尼亚科病毒中的白蛉病毒属属同一进化分支,提示该病毒属于布尼亚病毒科白蛉病毒属成员,暂将此新病毒命名为古尔图病毒(guertuvirus)。本研究首次从新疆乌苏古尔图山地草原革蜱(d.nuttalli)中发现布尼亚病毒科白蛉病毒属病毒,预示草原革蜱(d.nuttalli)可能是布尼亚病毒的另一媒介,新疆古尔图地区存在布尼亚病毒自然疫源地的可能性。新疆小型啮齿动物中新型布尼亚病毒的分子流行病学调查与分离鉴定。对新疆吉木萨尔县等5个地区的大沙鼠、子午沙鼠等7种野鼠进行sftsv核酸检测。通过rt-pcr的方法进行sftsv的s、m、l3个片段核酸特异性检测;用dnastar和mega5.05软件进行同源性和系统进化分析。结果从210只(78组)小型啮齿动物脏器中检测出28只携带sftsv;该病毒s、m和l片段核酸片段序列均与国内其他地区sftsv流行株具有较高的同源性,并且与人源和蜱类源sftsv代表株序列同源性较高,而与白蛉热病毒属的其它病毒相关序列相比差异较大。本研究首次从新疆吉木萨尔县等5个地区小型啮齿动物脏器中发现sfts病毒,该病毒属sfts病毒类群,与已知其他地区分离株有一定遗传差异,预示子午沙鼠可能是sftsv的另一自然宿主。3、新疆出血热病毒的分子流行病学调查及分离鉴定初步调查新疆地区蜱类和野鼠携带新疆出血热病毒(XHFV)的情况。通过RT-PCR方法对采集的蜱类和小型啮齿动物进行XHFV-S和XHFV-L核酸检测,结果从乌苏古尔图南山牧场的草原革蜱中检出1组S基因片段阳性标本。从78组(210只)小型啮齿动物脏器中共检出50组S基因片段阳性标本,2组L基因片段阳性标本,对阳性标本进行乳鼠颅内接种法分离病毒,结果可在乳鼠脑组织内检测到XHFV核酸。本研究首次在北疆的乌苏地区草原革蜱和子午沙鼠中检测到XHFV,提示在乌苏地区可能存在XHFV的感染,有可能是新疆出血热病毒又一新的自然疫源地,应加强做好对这一地区新疆出血热的预防控制工作。综上所述,本研究对2013年和2014年新疆部分地区小型啮齿动物及蜱类开展了虫媒病毒调查,分离到一株新的布尼亚病毒科白蛉病毒—古尔图病毒,是国内新发现的一株蜱媒病毒,乌苏地区可能存在古尔图病毒感染。首次证明草原革蜱和子午沙鼠感染有SFTSV和XHFV,这为掌握新疆地区虫媒病毒的种类、了解当地传染病原流行病特征以及为疾病的预防和控制提供科学依据。