玄胡索散由延胡索、补骨脂、当归、牛膝四味药组成,是临床治疗骨关节炎的经典复方,该方以延胡索为君药,臣以补骨脂补益肝肾,佐以当归补血活血,最后以牛膝引药下行,作用于病灶部位。玄胡索散组方经典,疗效确切,但是目前玄胡索散治疗骨关节炎的药效物质基础及作用机制依然不明确。本文以玄胡索散化学物质组学的研究为基础,将血清药物化学和网络药理学相结合,拟研究玄胡索散治疗骨关节炎的药效物质基础和分子作用机制。本研究的内容主要包括以下几个部分:一玄胡索散及其代表性单味药材化学成分的快速鉴别超高效液相色谱-四极杆飞行时间质谱联用技术(即UPLC-Q-TOF-MSE技术)是研究中药及复方化学成分的重要技术之一,具有高灵敏度和高分辨率。本研究采用UPLC-Q-TOF-MSE技术结合数据处理软件MassLynx和UNIFI,对玄胡索散复方及其代表性单味药材补骨脂和延胡索的化学成分进行了表征。实验鉴定出了补骨脂中化合物44个,延胡索中化合物32个,玄胡索散中化合物115个,为进一步的体内成分研究奠定了基础。二玄胡索散灌胃大鼠后的体内成分研究在充分研究了玄胡索散化学物质组学后,本研究以血清药物化学为理论基础,对玄胡索散灌胃大鼠后,其血浆、尿液和粪便中的原型成分和代谢成分进行了定性分析。首先利用UPLC-Q-TOF-MSE技术针对玄胡索散中4个代表性单体化合物补骨脂素、延胡索乙素、阿魏酸及蜕皮甾酮的体内药源性成分进行研究,分析其可能存在的代谢途径。然后利用UPLC-Q-TOF-MSE技术检测玄胡索散灌胃后的正常大鼠血样、尿样和粪便,鉴定出了玄胡索散在大鼠体内的药源性成分。从大鼠血样中鉴定出的药源性成分共50个,其中原型成分9个,代谢成分41个;从大鼠尿样中鉴定出的药源性成分共92个,其中原型成分23个,代谢成分69个;从大鼠粪便中鉴定出的药源性成分共77个,其中原型成分33个,代谢成44个。该实验确定了玄胡索散治疗骨关节炎的主要药效物质基础,为后续研究玄胡索散治疗骨关节炎的分子作用机制提供了基础。三玄胡索散治疗骨关节炎的分子作用机制初探本研究在前期血清药物化学的研究基础上,进一步运用网络药理学策略对玄胡索散治疗骨关节炎的分子作用机制进行了初步探究。以玄胡索散的9个入血原型成分为切入点,通过对中药化学成分靶点的预测,以及对骨关节炎疾病靶点的分析,确定了玄胡索散治疗骨关节炎的69个潜在作用靶点。在此基础上,利用String平台分析其化合物与疾病靶点的蛋白质-蛋白质相互作用,利用Cytoscape软件进行拓扑学分析,筛选出了 10个关键靶点,并使数据可视化。然后利用分子对接技术对9个化合物和10个关键靶点进行活性验证,发现所有Docking Score值均大于4.25,表示该9个入血原型成分是治疗骨关节炎的活性成分。利用String在线数据库进行GO生物分析和KEGG通路分析,GO生物分析发现该9个成分与骨关节炎相关的生物途径有1344个,分子功能有128个,细胞成分有65个,KEGG通路分析发现涉及的相关通路和相关代谢有35个。实验最后通过Cytoscape软件构建了“玄胡索散-中药-成分-靶点-通路-骨关节炎”的网络,体现了玄胡索散多成分、多靶点、多途径协同治疗骨关节炎的作用特点。综上所述,本研究基于化学物质组学、血清药物化学和网络药理学三大理论,对玄胡索散的复方化学成分、药效物质基础、分子作用机制进行了探究,筛选出了9个化学成分(+)-Corydaline、Tetrahydropalmatine、Leonticine、Psoralen、Angelicin、Bakuchiol、Senkyunolide K、Angeloylsenkyunolide F和Ecdysterone作为玄胡索散治疗骨关节炎主要的药效物质基础,发现了玄胡索散治疗骨关节炎最重要的5条信号转导通路和1条代谢通路,包括TNF信号转导通路、IL-17信号转导通路、MAPK信号转导通路、RLX信号转导通路、TLR信号转导通路和花生四烯酸代谢通路。