【摘 要】
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细菌素是细菌通过核糖体合成机制产生的一类具有抑菌活性的物质,对近似种或同源种有较强的拮抗作用,具有热稳定、广谱高效、无抗药性、无残留等特性,还具有一定的营养价值。与抗
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细菌素是细菌通过核糖体合成机制产生的一类具有抑菌活性的物质,对近似种或同源种有较强的拮抗作用,具有热稳定、广谱高效、无抗药性、无残留等特性,还具有一定的营养价值。与抗生素具有本质的区别,被认为是抗生素最有效的代替物。是生物农药、保健品、食品、饲料、化妆品的好材料,在医药、化工、食品加工等领域具有广泛的应用前景。本论文的研究内容主要包括高产细菌素菌株的筛选,菌株所产细菌素性质的初步研究及其发酵条件优化,并对其所产细菌素的结构进行了初步研究。首先从烟台黄曲霉污染严重的土壤样品中分离得到一株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及白色念珠菌都有抑菌活性的菌株,命名为Y-32-1,根据菌株的形态、生理生化特性及其16S rDNA系统发育分析,将其鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。菌株Y-32-1所产细菌素具有很好的耐酸碱性,发酵上清液显示抑菌活性的pH值为1-13;对热很稳定,发酵上清液沸水浴1.5h,其活性没有明显降低;对胰蛋白酶不敏感,对脂肪酶敏感,说明该细菌素中可能含有酯键。在单因素实验的基础上,运用Plackett-Burman实验和响应面相结合的方法,最终确定了其最佳培养条件和发酵培养基组成:接种种龄20h、接种量5%、装液量70mL/250mL、培养温度31.6℃、初始pH值7.2、摇床转速120r/min、玉米浆31.7g/L、蔗糖糖蜜2.0g/L、氯化钠6g/L、磷酸二氢钾5g/L、磷酸氢二钠5g/L。优化后所产细菌素的抑菌圈直径为24.6667mm,比优化前提高了12.16%。通过酸沉淀、有机溶剂萃取、柱层析等方法对Y-32-1所产细菌素进行了分离纯化,并利用电喷雾电离子质谱对其结构进行了表征。
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